分光光度计是一款将成分复杂的光，分解为光谱线的科学仪器，采用一个可以产生多个波长的光源，通过系列分光装置，从而产生特定波长的光源，光线透过测试的样品后，部分光线被吸收，计算样品的吸光值，从而转化成样品的浓度。已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸，蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。
因为参比溶液对光会存在一定的吸收，所以在比色前通常要将这部分吸收扣除，才更接近被测组分对光的吸收值，这样才能通过校正曲线来算得被测组分的浓度。分光光度计在进行光度测量时，利用参比溶液来调节仪器的零点，可以消除由于吸收池壁及溶剂对入射光的反射和吸收带来的误差，并扣除干扰的影响。参比溶液可根据下列情况来选择。
分光光度计参比溶液的选择
1、溶剂
试样组成简单，共存组分对测定波长的光无吸收。
2、试剂
显色剂或其它试剂对测定波长有吸收，按显色反应相同的条件，不加入试样的试剂。
3、试液
试样基体溶液在测定波长有吸收，显色剂自身无色，可按与显色反应相同的条件处理试样，只是不加入显色剂。
4、平行操作参比
用不含被测组分的试样，在相同的条件下与被测试样同时进行处理，得到平行操作参比溶液。
如在进行某种药物浓度监测时，取正常人的血样与待测血药浓度的血样进行平行操作处理，前者得到的溶液即可作为平行操作参比溶液。
注意事项
1、当试剂及显色剂均无色时，可用蒸馏水作参比溶液。
2、显色剂有颜色，可选择不加试样溶液的试剂空白作参比溶液。
3、显色剂为无色，而被测试液中存在其它有色离子，可用不加显色剂的被测试液作为参比溶液。
4、显色剂和试液均有颜色，可将一份试液加入适当掩蔽剂，将被测组分掩蔽起来，使之不再与显色剂作用，而显色剂及其它试剂均按试液测定方法加入，以此作为参比溶液，这样就可以消除显色剂和一些共存组分的干扰。
5、改变加入试剂的顺序，使被测组分不发生显色反应，可以把此溶液作为参比溶液消除干扰。
