myPOLS Biotec正在开发新一代的DNA聚合酶
myPOLS Biotec是一家来自康斯坦茨大学的生物技术公司,来自Andreas Marx教授的研究小组。凭借我们在高通量DNA聚合酶设计方面的专业知识,我们为您的应用定制酶。
研发活动包括:
改进的DNA聚合酶用于SNP检测和甲基化特异性PCR。
病原体检测分析,例如用于流感和诺如病毒诊断。
具有逆转录酶活性的热稳定DNA聚合酶。
抑制剂抗性聚合酶,用于从样品中直接PCR,如全血,唾液,细菌,细胞 - 颗粒,植物等。
Isotherm2G DNA聚合酶
myPOLS Biotec正在开发新一代的DNA聚合酶
用于和可靠的应用,例如个性化医疗,病原体检测,DNA和RNA诊断,法医学等等。
Isotherm2G DNA聚合酶
是一种嗜温性DNA聚合酶,非常适合等温扩增。它可以从具有高链置换活性的DNA和RNA模板合成DNA。Isotherm2G已被突变,以提高反转录活性。在55-70°C之间活跃。Isotherm2G DNA聚合酶是等温扩增反应的优先选择,如环介导的等温扩增(LAMP),链置换扩增(SDA),滚环扩增(RCA),分枝扩增(RAM),基因组扩增等。Isotherm2G DNA聚合酶以8 U / µl含甘油溶液的形式提供。它与足够量的10x反应缓冲液一起使用,该缓冲液已针对等温扩增进行了优化。缓冲液中含3.25 mM镁离子,终浓度为1x。镁,引物和dNTPs的宜浓度在很大程度上取决于所应用的应用,应该对其进行优化。
Volcano2G DNA聚合酶
Volcano 2G是原始Volcano DNA聚合酶的高级版本,具有进一步改善的逆转录活性。该酶是一种经过工程改造的,极耐热的逆转录酶和组合的DNA聚合酶,可通过定向的人工进化获得。Volcano2G DNA聚合酶可直接从RNA模板(无需等温逆转录步骤)直接促进“零步骤" RT-PCR,因为逆转录与循环PCR延伸步骤中的DNA扩增同时进行。这也允许在高温下进行逆转录反应,从而将在高温下融化的RNA中强大的二级结构所遇到的问题降至低。
Volcano2G DNA聚合酶包含热启动剂配制的,具有逆转录酶活性的工程稳定的热稳定DNA聚合酶和稳健的Taq DNA聚合酶的酶混合物。基于适体的热启动剂设计用于在低温下(例如,在移取反应混合物时)阻断非特异性DNA聚合酶活性,但会在高于50-55°C的温度下分解,从而释放出现已*活化的DNA聚合酶。
Volcano2G DNA聚酶作为5 U / µl甘油库存与适当的5x Volcano反应缓冲液一起运输,该缓冲液针对60-300 bp的扩增子进行了优化。Volcano2G逆转录酶可以可靠地从≥1 ng的总RNA输入中检测RNA靶标。它不需要Mn 2+即可 获得宜活性。但是,可以通过向反应中添加Mn 2+来进一步优化某些检测方法(建议范围是0.5-1 mM,未提供Mn 2+)。
RT-PCR活性:已对 Volcano3G RT-PCR Mix进行了成功的RT-PCR性能测试。在实时PCR循环仪中从人总RNA提取物中扩增出151 bp片段(HPRT1 mRNA),并可视化为单个扩增产物。
DNA聚合酶活性:使用人工DNA模板和DNA引物监控Volcano3G DNA聚合酶活性并将其调整为特定的DNA聚合酶活性。
酶浓度由蛋白质特异性染色确定。
带有“ 0步"方案的便捷RT-PCR零步协议节省时间
跳过逆转录步骤。不需要等温逆转录步骤。
Volcano2G是一种具有PCR活性的逆转录酶,非常稳定,在95°C下的半衰期> 40分钟。
灵敏的RNA检测 当添加实时PCR染料时,Volcano2G DNA聚合酶也可用于实时PCR。Volcano2G具有Taq DNA聚合酶样核酸酶结构域,使其也适用于基于水解探针的分析。如此处所示,通过使用基于探针的qPCR分析和零步RT-PCR方案,使用总RNA的10倍稀释系列检测了NONO mRNA。来自细胞的直接RT-PCR 对于细胞RNA的可靠RT-PCR,样品制备步骤*。然而,这些步骤费力,费时并且需要额外的消耗品。使用我们的VolcanoCell2G RT-PCR 2x预混液,您可以用快速便捷的“零步长"方案代替费力的RNA制备。节省时间和金钱 VolcanoCell2G RT-PCR 2x预混液具有简化的“零步骤"工作流程,使您可以规避费力的纯化和提取步骤,从而节省了时间和金钱。
出色的灵敏度
VolcanoCell2G RT-PCR 2x实现了低至单个细胞的检测灵敏度。在此示例中,按照VolcanoCell2G协议从单个隆德人中脑(LUHMES)细胞中检测到GAPDH mRNA。Isotherm2G DNA polymerase Isotherm2G DNA聚合酶是一种嗜温DNA聚合酶,它从DNA和RNA模板合成DNA,具有高链置换活性。Isotherm2G是原始Isotherm DNA聚合酶的下一代,具有进一步改善的逆转录活性。宜温度(55-70°C)使Isotherm2G DNA聚合酶成为等温扩增反应的优先选择,如环介导等温扩增(LAMP),链置换扩增(SDA),滚环扩增(RCA),衍生物扩增(RAM),基因组扩增等。#8801S Isotherm2G DNA聚合酶 1600 U,8U /μl,200μl#8801M Isotherm2G DNA聚合酶 8000 U,8U /μl,1000μl就是这么简单:只需在59°C温育30分钟,就可以使用LAMP方法扩增DNA目标(红色曲线)和RNA目标(蓝色曲线)。Isotherm可用于RCA,SDA,RAM,LAMP和许多其他放大技术。 Isotherm DNA聚合酶也具有非常好的逆转录活性。扩增后,可以进行熔解曲线测量以确认特定产物的产生。因此可以进行DNA和RNA检测,从而实现简单的反应设置,快速的反应时间和闭管系统。应用• 快速,等温检测和鉴定DNA和RNA靶标• 逆转录• 实时等温检测• LAMP,SDA,RCA,RAMP• 入门扩展反应设置零件 卷 终浓度底漆混合物(各种浓度) 各种μl 各个dNTPs(10 mM) 1μl 400μM10 x Isotherm2G反应缓冲液 2.5μl 1X等温线DNA聚合酶8 U /μl 1μl 8 U /反应模板/样品提取物 各种μl 各个不含核酸酶的水 总反应体积高达25μl 将所有组件保存在冰上。在使用前仔细旋转并混合所有溶液。 引物混合物和浓度很大程度上取决于所采用的等温反应方法。Isotherm2G和Isotherm2G反应缓冲液不含荧光染料。对于实时测量,请添加适量的合适染料。详细的产品说明内容Isotherm DNA聚合酶以含有甘油的8U /μl溶液形式提供。它配有针对等温扩增优化的10倍反应缓冲液。质量控制DNA聚合酶活性:使用人工DNA模板和DNA引物监测等温线活性并将其调整为特定的DNA聚合酶活性。通过蛋白质特异性染色确定酶浓度。有关批次特定浓度,请通过info@mypols.de查询更多信息。 法律信息某些等温扩增方法可能受到保护。购买此产品不会向购买者传达使用所购产品进行任何商业目的的任何等温扩增方法的合法权利。存储本产品采用冷藏包装。请在抵达-20°C时存放产品。
品牌 | 货号 | 品名 | 规格 | |
mypols | 8100S | Volcano2G DNA聚合酶 | 250 U,5U /μl,50μl | |
mypols | 8100M | Volcano2G DNA聚合酶 | 1000U,5U /μl,200μl | |
mypols | 6101S | Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix | 100 reactions á 25 µl,1 x 1.25 ml | |
mypols | 6101M | Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix | 500 reactions á 25 µl,5 x 1.25 ml | |
mypols | 6201S | Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix (+ROX) | 100 reactions á 25 µl,1 x 1.25 ml | |
mypols | 6301S | Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix (+GreenDye) | 100 reactions á 25 µl,1 x 1.25 ml | |
mypols | 6401S | Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix (+GreenDye, +ROX) | 100 reactions á 25 µl,1 x 1.25 ml | |
mypols | 7101S | VolcanoCell2G RT-PCR 2x Master Mix (including separate lysis buffer) | 100 reactions à 25 µl, 1 x 1.25 ml | |
mypols | VolcanoCell2G RT-PCR 2x Master Mix (including separate lysis buffer) | 500 reactions à 25 µl, 5 x 1.25 ml | ||
mypols | 8801S | Isotherm2G DNA polymerase | 1600 U, 8U/µl, 200 µl | |
mypols | 8801M | Isotherm2G DNA polymerase | 8000 U, 8U/µl, 1000 µl |
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