产品 | 货号 | 包装(干粉) | 价格 |
CA-SiR Ligand | CA-SiR-1 | 50 nmol | 7500 |
CA-SiR-2 | 5 nmol | 1320 | |
CA-TMR Ligand | CA-TMR-1 | 150 nmol | 4500 |
CA-TMR-2 | 15 nmol | 1320 | |
CA-R110 Ligand | CA-R110-1 | 50 nmol | 7500 |
CA-R110-2 | 5 nmol | 1320 | |
CA assorted Ligands | CA-1 | CA-SiR-2 *1 | 3200 |
CA-TMR-2 *1 | |||
CA-R110-2*1 |
1、产品信息
产品 | 货号 | 包装(干粉) | λEx /λEm (nm) | 适用范围 | 储存条件 |
CA-SiR Ligand | CA-SiR-1 | 50 nmol | 651/668 | Confocal、SIM、STED | -20℃避光 |
CA-SiR-2 | 5 nmol | ||||
CA-TMR Ligand | CA-TMR-1 | 150 nmol | 555/578 | Confocal、SIM | |
CA-TMR-2 | 15 nmol | ||||
CA-R110 Ligand | CA-R110-1 | 50 nmol | 505/527 | ||
CA-R110-2 | 5 nmol | ||||
CA assorted Ligands | CA-1 | CA-SiR-2 *1 | -- | Confocal、SIM、STED | |
CA-TMR-2 *1 | |||||
CA-R110-2*1 |
2. 产品简介
HaloTag 技术基于融合蛋白标签和合成荧光配基之间共价键的形成,可用于标记细胞或其 他生化环境中的目的蛋白以表征和分析其定位及功能。HaloTag 报告基因蛋白是 33kDa 的单体 蛋白,是一种经基因工程改造、无催化活性的水解酶衍生物,在生理条件下可以快速和 HaloTag 荧光配体形成不可逆的共价键从而实现对目的蛋白的高特异性标记[1]。此技术已经广泛应用于 哺乳动物细胞、植物、细菌、酵母和活体模式动物等生物体系。
CA-SiR Ligand 则是一款以四甲基硅罗丹明为母体的远红发射荧光配体,基于其在溶液中 无色亲酯的内酯结构和标记在 HaloTag 蛋白后荧光的两性离子结构之间的高效转换,可以实现 对目标蛋白的“免洗"标记。
CA-TMR Ligand 和 CA-R110 Ligand 是以氧罗丹明为母体的荧光配体,二者皆具有良好 的荧光亮度、较高的光稳定性、较低的光毒性和较好的细胞膜渗透能力;目前已广泛应用于宽 场、共聚焦、单分子定位示踪和 SIM 超分辨成像等多种模态的成像系统中,其较好的生物相 容性使其可以应用于哺乳动物细胞、植物、细菌、酵母等生物体系的荧光成像。
相较于 CA-TMR Ligand 和 CA-R110 Ligand 荧光配体,CA-SiR Ligand 荧光配体不仅具有 良好的荧光亮度、较高的光稳定性和较低的光毒性,其jijia的生物相容性和高效的细胞膜渗透能力,使得 CA-SiR Ligand 荧光配体在哺乳动物细胞、植物、细菌、酵母和活体模式动物等生 物体系中有着广泛的应用,并可在除宽场、共聚焦、单分子定位示踪和 SIM 之外的 STED 超 分辨成像体系中进行活细胞荧光成像。
3.实验步骤
3.1 在 CA-SiR Ligand 中加入 50 μL/5 μL 新鲜干燥的 DMSO,混合均匀,得到 1 mM 母液。
3.2 将培养基预热至 37 ℃,将 CA-SiR Ligand 母液按照 1000- 5000 倍稀释比例加入到预热的 培养基中,稀释后的染液建议尽快使用,久置后可能导致部分染料分解或沉淀。
3.3 吸去已经表达 Halo-tag 蛋白细胞的培养基,更换为稀释好的培养基染液,在培养箱中孵育
5-15 分钟后即可在不更换培养基的情况下进行“免洗"荧光成像。也可以对用预热的培养基 清洗细胞一至两次后用于荧光成像。
注:1、我们建议对大多数细胞系使用 200-250 nM,如 HeLa、COS7、U-2OS 等;对组织或活 体动物染色使用 500-1000 nM。
2、不同样品染色条件有所差异,建议起始染色方法为 1000 倍稀释,15 分钟染色,请根 据实际染色效果进行调整。
3、CA-TMR Ligand 和 CA-R110 Ligand 细胞渗透性荧光配基的实验步骤类同上述实验操 作。