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货号 | 名称 | 规格 |
SH0048 | 植物原花青素（OPC）检测试剂盒（微量法100T/48S） | 100T/48S |
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
原花青素（Oligomeric Proantho Cyanidins，OPC）是一类黄烷醇单体及其聚合体的多酚化合物，广泛存在于植物的各种器官中，具有jiqiang的抗氧化性和清除自由基的作用，广泛的应用于医药，食品，化妆品，保健品行业。
测定原理：
在酸性条件下，植物原花青素A环上的jianbenerfen和jianbensanfen与xiangcaoquan发生缩合反应，产生有色化合物，在500nm处有特征吸收峰，测定500nm光吸收值可计算原花青素的含量。
组成：
产品名称 | SH0048-100T/48S | Storage |
提取液： | 60%乙醇，自备 | 4℃ |
试剂一：液体 | 8%盐酸10ml | 4℃ |
试剂二：粉剂 | 1瓶 | 4℃避光 |
说明书 | 一份 | |
试剂二：粉剂0.1g×1瓶，4℃避光保存，临用前加10ml甲醇溶解。
测定工作液：临用前按照用量将试剂一和试剂二按照1:1混合。
空白工作液：临用前按照用量将试剂一和甲醇按照1:1混合。
自备仪器和用品：
天平、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水、盐酸、无水乙醇和甲醇。
OPC提取：
称取约0.1g样本，加入2ml提取液，匀浆后，60℃振荡提取2h， 10000g，25℃，离心10min，取上清待测。
测定操作表
1、 分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长至500nm，蒸馏水调零。
2、 操作表
对照管 | 测定管 | |
样本（μl） | 40 | 40 |
测定工作液（μl） | 160 | |
空白工作液（μl） | 160 | |
混匀，30℃水浴30min，于微量石英比色皿/96孔板中检测500nm处吸光值，ΔA=A测定-A对照，每个测定管设一个对照管。 | ||
OPC计算公式：
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线：y=0.0194x+0.0006，R2=0.999
OPC含量（mg/g 鲜重）= (ΔA-0.0006）÷0.0194×V反总÷(V样÷V样总×W)×10-3
= 0.515×(ΔA-0.0006）÷W
V样总：加入提取液体积，2ml； V反总：反应总体积，0.2ml；V样：反应中样品体积，0.04ml；W：样品质量，g
b.用96孔板测定的计算公式如下
标准曲线：y=0.0097x+0.0006，R2=0.999
OPC含量（mg/g 鲜重）= (ΔA-0.0006）÷0.0097×V反总÷(V样÷V样总×W)×10-3
= 1.03×(ΔA-0.0006）÷W
V样总：加入提取液体积，2ml； V反总：反应总体积，0.2ml；V样：反应中样品体积，0.04ml；W：样品质量，g
注意事项：
1、配制好的试剂二应尽快使用，4℃保存时间不超过一个月。
2、吸光度变化应该控制在0.01～0.8之间。否则加大样品量或稀释样品，注意计算公式中参与计算的稀释倍数要相应改变。
3、zuidi检出限为10μg/g。
