检测系统是用于免疫反应研究和试剂盒生产的敏感技术，发挥着非常重要的作用。虽然小鼠热休克因子1（HSF1）ELISA试剂盒操作过程看起来比较简单，但实验过程有很多要求。在实验室里，试剂的制备一般都不太重视。一般的做法是在实验过程中把试剂从冰箱里拿出来立即使用，而忽略了这种做法可能会影响后续孵化时间的问题。直接的结果是，对一些弱阳性样品的检测出现假阴性。
因此，小鼠热休克因子1（HSF1）ELISA试剂盒测定中的试剂准备最重要的是在实验前将试剂盒从冰箱中取出，在室温下放置20min以上，然后再进行测定，使试剂盒在使用前与室温平衡。这样做的目的是为了使反应微孔中的温度在随后的孵化反应中迅速达到要求的高度，从而达到测定的要求。
目前，ELISA试剂盒中的洗板液在实验室使用时需要通过稀释提供的浓缩液来配制，所以稀释用的蒸馏水或去离子水的质量应得到保证。当试剂盒使用OPD作为底物时，应在反应和显色前临时制备底物溶液。其实，不仅是ELISA实验，每个试剂实验都是一样的。它需要按照程序来操作。在使用前，一定要阅读说明书，并对每个实验进行总结，这样才能使实验更加完整、美观。
小鼠热休克因子1（HSF1）ELISA试剂盒实验过程中的注意事项如下。
1、正式试验时，应分别用阳性对照和阴性对照控制试验条件，待测样品应一式两份，以保证试验结果的准确性。有时背景高，说明有非特异性反应，可用羊血清、兔血清或BSA封存。
2、在ELISA中，选择各种实验条件是很重要的，包括。
（1）固体载体的选择。许多物质可以作为固体载体，如PVC、聚苯乙烯、聚丙烯酰胺和纤维素。它的形式可以是凹板、试管、珠子等。目前，常用的是40孔聚苯乙烯凹板。无论哪种载体，在使用前都可以进行筛选：涂上等量的抗原，在相同的实验条件下进行反应，观察其颜色反应是否均匀，从而判断其吸附性能是否良好。
（2）包被抗体（或抗原）的选择。抗体（或抗原）在固体载体表面吸附时，要求其纯度好，PH值一般要求在9.0～9.6之间。吸附温度、时间和蛋白质含量也有一定影响。一般情况下，4℃下使用18-24小时。蛋白质包衣的浓度需要滴定：即不同的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μG/ml等），在其他试验条件相同的情况下，观察阳性样品的OD值。选择OD值大而蛋白质少的浓度。通常1～10为大多数蛋白质μg／ml。
