制备特异性高的抗人Ig G和抗人Ig M单克隆抗体,并应用于临床血清学检测试剂盒,为其提供优质的二抗.方法:以人Ig G和Ig M为抗原,免疫BALB/c小鼠,通过传统杂交瘤融合和筛选技术制备抗人Ig G和抗人Ig M单克隆抗体;经体内诱生法制备腹水并纯化;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和Western印迹进行交叉筛选和特异性鉴定,并对筛选出的单抗进行辣根过氧化物酶（HRP）标记,再与市售的检
抗大鼠免疫球蛋白M（IgM）抗体说明书
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名 称：抗大鼠免疫球蛋白M（IgM）抗体。
克 隆 号：YIG232。
目 录 号：YP826512。
亚 型：IgG。
缓 冲 液：0.01mol/L的PBS、pH：7.2、0.2%Procline-300。
免 疫 原：大鼠免疫球蛋白M 。
制备方法：取健康BALB/C小鼠单抗腹水。
纯化方法：亲和纯化。
应用范围：抗体针对的是大鼠免疫球蛋白M表位，适用于ELISA、CLIA、 WB、IHC等免疫实验。
产品纯度：不低于总蛋白的95%。
储存方法：存放在-20℃。
注意事项：避免反复冻融。
有效期限：请您在管体注明有效期内使用。
使用建议：本产品可以用于大鼠免疫球蛋白M的免疫学反应相关实验。
应用细胞工程技术研制大菱鲆免疫球蛋白M(immunoglobulin M,IgM)的单克隆抗体并分析其免疫学特性。小鼠骨髓瘤细胞NS0与经IgM免疫的BALB/C小鼠脾细胞融合,经过反复有限稀释法克隆,筛选获得4株抗大菱鲆IgM的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别为B1D1、D5C2、E1B2和F4A1。经小鼠腹水扩大生产后,单抗效价为1∶1.024×106检测灵敏度为32 ng/mL。Western blot分析表明,获得的单抗与IgM重链区特异性结合。交叉结果显示,单抗与大菱鲆血清呈强阳性反应,与褐牙鲆、红鳍东方鲀、许氏平鲉、六线鱼、鲈鱼均呈微弱阳性反应,而与半滑舌鳎、鲤鱼、鲫鱼、草鱼、鳙鱼的血清无交叉反应。本研究制备的大菱鲆IgM单克隆抗体效价高、灵敏度高、特异性强,适合用于大菱鲆免疫学相关研究和生产实际应用。制备特异性高的抗人Ig G和抗人Ig M单克隆抗体,并应用于临床血清学检测试剂盒,为其提供优质的二抗.方法:以人Ig G和Ig M为抗原,免疫BALB/c小鼠,通过传统杂交瘤融合和筛选技术制备抗人Ig G和抗人Ig M单克隆抗体;经体内诱生法制备腹水并纯化;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和Western印迹进行交叉筛选和特异性鉴定,并对筛选出的单抗进行辣根过氧化物酶(HRP)标记,再与市售的检测病原微生物抗体试剂盒中对应的HRP标记的二抗(抗人Ig G和抗人Ig M)做对比分析.结果:筛选到2株可稳定分泌抗人Ig G单抗和2株抗人Ig M单抗,经交叉反应,Western印迹及对比实验分析,证明这4株单抗效价高,特异性好,比临床试剂盒中的酶标二抗特异性强,敏感度高.结论:获得4株特异性强,敏感度高的抗人Ig G和抗人Ig M单克隆抗体,可为各种病原微生物血清学的检测提供二抗试剂,具有良好的应用价值.
