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伊莱博生物科技（上海）有限公司
主营产品： 动物行为学检测,大中小型动物实验,细胞培养服务 |
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成年小鼠关节软骨细胞原代培养
| 参考价 | ￥0.9-￥1 | /件 |
具体成交价以合同协议为准
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型号
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品牌
其他品牌 -
厂商性质
其他 -
所在地
上海市
更新时间：2024-03-22 17:40:24浏览次数：143
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1. C57小鼠，8-10周，通过颈椎脱位处死，浸入75%乙醇浸泡5分钟，转移到通风柜中的解剖盘中。
2. 使用ykj和nz，使髋关节脱臼，保持股骨头完整。
3. 用zxq去除每个股骨头的软骨帽，将组织放入含2%双抗的PBS中。
4. 用冰冷的含2%双抗的PBS清洗2-3遍，将关节软骨小心移到2ml离心管中。
5. 用ykj将软骨帽剪成约1mm3的碎片，加入3ml预热的Collagenase D（1.5mg/ml）。
6. 放入37℃、80rpm的摇床中进行第一次消化，时间2h 。
7. 第一次消化结束后，加入含血清的培养基终止消化，40um的细胞筛过滤后，离心1500rpm，2min。
8. 沉淀用DMEMwq培养基重悬，计数，种植在24孔板中。
9. 在未消化的组织中加入3ml预热的Collagenase D，放入37℃、80rpm的摇床中进行第二次消化，时间2h，然后收集细胞。
