4× EZscript Reverse Transcription Mix II

一、试剂盒简介
      本试剂盒为包含去除基因组DNA的高效DNase的新一代快速逆转录试剂盒，与上一代产品相比具有更高的逆转录效率。试剂盒中主要包含4管成分：gDNA Remover中主要包括浓缩的DNase及Buffer；4× EZscript RT Mix II中主要包含了逆转录所需的除引物以外的所有成分（逆转录酶、buffer、RNase Inhibitor、dNTPs等），Oligo dT18、Random Hexamer为独立包装，便于添加目标片段特异性引物（如microRNA, lncRNA, circRNA等的特异性引物）。
      本试剂盒采用的DNase及Buffer反应系统经过特殊的优化，仅需室温（25°C）反应5分钟，就能降解95%以上的基因组DNA，*的降低了可能残留的基因组对结果的干扰。
      本试剂盒采用的新型M-MLV突变体逆转录酶具有很强的抗*力及扩增能力，扩增效率尤佳，同时采用了目前新型优化的反应体系，进一步提高了逆转录效率。使用本试剂盒逆转录15分钟得到的扩增产物量可以达到AMV逆转录酶大约1h的产物量（Ct值相同）。后续逆转录产物建议用于PCR、qPCR、基因克隆等实验。
 
二、产品组分

*1：包括逆转录酶、buffer、RNase Inhibitor、dNTP Mixture等组分。
 
三、保存条件
    本试剂盒建议置于-20℃保存。
 
四、试剂盒特点
    1、本试剂盒为预先混好的4× EZscript RT Mix II，只需加入模板RNA和水混匀后便可以开始反应；使用了新一代逆转录酶，具有更强的酶活性和更高的灵敏度。
    2、含有去除基因组DNA的gDNA Remover，只需室温5分钟即可去除基因组DNA。
    3、只需42℃、15分钟即可高效合成荧光定量PCR所需的高质量cDNA模板，是进行荧光定量PCR反应的理想试剂。
    4、含有Oligo(dT)18和Random Hexamer两种反转录引物，可根据实际情况区别使用。反转录反应可使用Oligo(dT)18引物或者Random Hexamer引物，也可以Oligo(dT)18和Random Hexamer两种引物同时使用。只扩增一种目的基因时，也可以使用Specific Primer作为反转录引物。
 
五、注意事项
    1、当同时需要进行数次反应时，应先配制各种试剂的混合液，然后再分装到每个反应管中。这样可使所取的试剂体积更准确，减少试剂损失，避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。
    2、4× RT Master Mix在使用前需Vortex振荡混匀，轻轻离心后使用。由于酶保存液中含有50%的甘油，粘度高，分取时应慢慢吸取。同时，要使用精确、量程适合的移液枪，并且不要使Tip插入液面过深，否则会因Tip壁粘着造成损失，而使酶量不足。
    3、分装试剂时务必使用新的枪头 (Tip)，以防止样品间污染。