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新生牛血清是通过对出生12-24小时新生牛进行静脉采血而得到的血清。新生牛血清中营养丰富,蛋白含量和各种生长因子都较高,价格较胎牛血清低得多,是目前动物细胞培养中极为常用的血清。
一、新生牛血清特点:
1、来自通过心脏穿刺新生牛无菌收集的凝结的血液,是高铁和高铁传递蛋白水平的新生牛血清。
2、每个批次都经过严格的控制和测试,新生牛血清批次间的差异小,质量均一。
3、新生牛血清是无菌过滤的,并且pH值是中性的,适合于细胞的生长。
4、厂家对新生牛血清进行内毒素检查,超过细胞培养试验标准。介质不大于0.625欧/毫升,不含病毒制剂。
5、新生牛血清是由各种大小的生物分子和不同激素浓度组成的复杂混合物,营养丰富。
二、新生牛血清保存方法:
1、长期保存的血清必须储存于-20℃ - 70℃低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月。由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。
2、一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤**。如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清。
3、血清解冻: 瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室温,待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。
三、解冻血清注意事项:
将血清从冷冻箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室温下使之全溶。但必须注意的是,溶解过程中必须规则地摇晃均匀。
1.解冻血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-2O℃至4℃至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃),实验显示非常容易产生沉淀物。
2.解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生
3.请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。
4.血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。
5.若必须做血清的热灭活,新生牛血清请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。
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