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大鼠细胞株实验中注意事项:
1、大鼠细胞株和生物安全柜(或超净工作台)先开紫外照射30min。作用:对环境灭菌(空气)。(备注:如果着急,至少也要开15分钟)
在做实验之前考虑好需要些物品。开始照射之前,将所需要用到的物品都放到生物安全柜(或超净工作台)里面。
常用移液枪或电动移液器等,需要在工作台上放置一套专用设备。
细胞培养箱一般都已经调整好。定期留意一下二氧化碳是否足够。不够及时更换。
2、 显微镜需要定期消毒酒精擦拭。注意:显微镜一般都放在细胞房。
3、 进入实验之前,首先给自己带上拖鞋、头套,口罩,实验服,手套(手套带双层)。注意:手套要将袖口套进去。实验服、拖鞋*是细胞房专用。
4、 开始操作之前先观察大鼠心肌细胞株细胞。
首先观察细胞培养液的颜色。现在的细胞培养液通常都放有酸碱指示剂(绝大部分是酚红)。细胞在培养生长过程中,不断在培养液上清中累积酸性物质,时间长了,培养液变为黄色(同时培养液中营养物质耗尽)。
其次镜下观察大鼠心肌细胞株细胞的生长状态是否良好,是否需要传代。如果生长状态不好,需要对培养液进行调整(一般是加大血清浓度)。过于密集出现大片融合或太密集而导致细胞脱落,则进行传代。
如果长势良好,且细胞培养液颜色未发生变化,可以酌情进行1/2、 1/3、1/4换液,也可以全换液。总之,视细胞生长情况而定。
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