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静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养操作步骤

时间:2024/11/25阅读:41
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  原代细胞培养是将机体内的某组织取出,分散成单细胞,在人工条件下培养使其生存并不断生长、繁殖的方法。借助这种方法可以观察细胞的分裂繁殖、细胞的接触抑制、以及细胞的衰老,死亡等生命现象。静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养:
 
  1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
 
  2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
 
  3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
 
  4、 胎牛血清浓度为10%-80%;
 
  5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
 
  6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
 
  7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
 
  8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。

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