小鼠检测试剂盒几点注意事项方法

小鼠检测试剂盒原理 
利用离心柱内硅基质膜提取样品总 RNA，在高效反转录酶的作用下，以 RNA 为模板，以 引物为起点合成与 RNA 模板互补的 cDNA 链。在热启动 Taq 酶的作用下，经高温变性、中温退火 及延伸的循环，使特异 DN段的拷贝数放大一倍，经荧光素标记的探针与扩增的 DNA 杂交，利 用 Taq 聚合酶的 5'→3'外切活性，使荧光探针的报告基团与淬灭基团分离，发出特异性荧光信号，利 用荧光 PCR 仪检测特异性荧光信号，根据样品 Ct 值的大小及扩增曲线的形成情况判定结果。

小鼠检测试剂盒注意事项：

1．所有接触病料的物品均应合理处置，以免污染实验室。

2．PCR  整个试验分配液区、模板提取区、扩增区。流程顺序为配液区→模板提取区→扩增区。严 禁器材和试剂倒流。

3．所有试剂应在规定的温度储存。-20℃保存的各试剂管使用前应*融化，8000 rpm 离心 15 s， 使液体全部沉于管底，放于冰盒中，吸取液体时移液器吸头尽量在液体表面层吸取，使用后立 即放回-20 ℃。

4．在 RNA 提取过程中，避免 RNA 酶污染，尽量缩短操作时间。

5．注意防止试剂盒组分受污染。不要使用超过有效期限的试剂，试剂盒之间的成分不要混用。

6．严格遵守操作说明可以获得的结果。操作过程中移液、定时等全部过程必须精确。

7．反应体系应在特定配液区或者超净工作台中配制，整个实验过程严格控制污染。

8．反复冻融试剂将减低检测灵敏度，本试剂盒应在 3 次内用完，请严格按试剂盒说明书操作。