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制作标准曲线, 以减去本底后的OD值为X轴,标准品的浓度为Y轴,利用作图软件得出一个合适的计算方法。建议使用合适的软件来作图,比如CurveExpert 1.4。这款软件能够给出很多种方法(比如直线、半对数、对数、四参数方程等)并从中选择一条最合适的方程。要想检验某条曲线是否与表中数据吻合,可以将标准品的浓度作为未知数,将对应的OD值带入该方程,计算出标准品的浓度,得到的结果应该与实际浓度很接近(+/-10%)。选择拟合度的那条曲线。
以下是CurveExpert1.4的使用过程:
1. 将OD值和标准品浓度数据复制粘贴到表格中
2. 生成和选择标准曲线
3. 通过曲线计算样品浓度
输入OD值,点击“计算"按钮,得到样品的准确浓度。
或者得到相关方程,通过excel来计算浓度。
如果需要导出方程,可点击“复制",粘贴至excel中。
4. 对于OD值落在标准曲线之外的情况
如果样品的OD值超过标准曲线的值,在实验前应该先将样品稀释从而得到准确的浓度。样品的最终度应该是计算出的浓度乘以稀释倍数。
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