CTACK/CCL27检测试剂盒 返回列表页

实验原理：
是采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法：
1、   血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、   血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、   细胞上清液---1000×g离心10分钟除颗粒和聚合物。
4、   组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
5、   保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

标本要求：
1. 血清：：温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
2. 血浆：根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
3. 尿液：无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4)，或组织蛋白萃取试剂，用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多，而且其操作中有一定的技术要求，在检测过程中除正常反应外，有时常见到一些错误的结果。引起ELISA测定错误结果的原因主要有：
①标本因素；
②试剂因素；
③操作因素。
下面就一些常见ELISA操作过程中的问题一一分析。
1．样品稀释 酶联免疫反应是一种敏感性很高的反应，如果血清不稀释，不可避免会产生很强的非特异性反应，出现假阳性。因此，国外检测血清抗体的试剂盒，均规定将血清稀释至适当的倍数，以降低非特异性反应，使特异性的抗原抗体反应充分体现出来。一般产品的样品稀释倍数均通过大量试验确定，以保证试验的灵敏度和特异性。但是，有些用户未能严格按使用说明书操作，如某些产品应取10μl样品进行稀释，个别用户取5μl甚至1μl样品进行稀释，由于吸嘴上不可避免地沾有样品以及微量移液器的精度不够，因此造成样品稀释倍数不准确，检测结果出现问题。
2．试剂盒平衡 试剂盒中所有试剂和板条均应在试验前平衡至室温（约25℃），一般需在室温放置20～30分钟以上。平衡时间太短会造成试剂混匀不够，样品孵育时间相对缩短，ELISA反应不够充分。冬季室温低，可将试剂盒置37℃温箱20分钟。 
3．样品和试剂的混匀 稀释前、后的样品必须充分混匀，所有试剂在加样前也须摇匀，以保证试验的均一性。
下列是公司是正在的产品：
大鼠白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠胰岛素自身抗体(IAA)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠可溶性Toll样受体6(sTLR6)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠载脂蛋白H(ApoH)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠肾上腺髓质素(ADM)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠β内啡肽受体(βEPR)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠钙/钙调素依赖性蛋白激酶2(CAMK 2)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠肝脂酶(HL)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠烟碱型乙酰受体(NAChR)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠毒蕈碱型乙酰受体(MAChR)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠活化蛋白C(APC)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠甘丙肽/甘丙素(GAL)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠α葡萄糖苷酶(αglucosidase)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠破骨细胞分化因子(ODF)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠Toll样受体9(TLR9/CD289)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠可溶性Toll样受体2(sTLR2)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠前列腺素F2α(PGF2α)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠白三烯E4(LTE4)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠(UK)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠碱性磷酸酶(ALP)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠血管生成素4(ANG4)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠缪勒管抑制物质/抗缪勒管激素(MIS/AMH)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠雄激素(androgen)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠睫状神经营养因子(CNTF)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPRⅡ)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠骨成型蛋白受体1A(BMPR1A)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠骨成型蛋白4(BMP4)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠骨成型蛋白2(BMP2)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠白介素2(IL2)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠白介素1α(IL1α)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠白介素18(IL18)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠白介素10(IL10)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠胰岛素样生长因子2(IGF2)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠血管生成素1(ANG1)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠角化细胞内分泌因子(KAF)/双调蛋白(AR)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠白细胞活化黏附因子(ALCAM)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠白介素9(IL9)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠酸性成纤维细胞生长因子1(aFGF1)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠凋亡相关因子配体(FASL) elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠凋亡相关因子(FAS/CD95)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠红细胞生成素(EPO)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠红细胞生成素受体(EPOR)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠血管内皮细胞生长因子D(VEGFD)elisa kits试剂盒 免费代测

Western Blot封闭液2（奶粉，pH7.5）（可提供标记服务）
哺乳动物蛋白抽提试剂（可提供标记服务）
过硫酸铵（APS）（可提供标记服务）
0.5M EDTA (PH8.0)（可提供标记服务）
Streptavidin-HRP（IHC工作液）（可提供标记服务）
Western洗涤液（可提供标记服务）
酵母蛋白抽提试剂（可提供标记服务）
考马斯亮蓝G250（可提供标记服务）
1%盐酸酒精（可提供标记服务）
DAB显色试剂盒（20×）（可提供标记服务）
Western二抗稀释液（可提供标记服务）
组织蛋白抽提试剂（可提供标记服务）
考马斯亮蓝R250（可提供标记服务）
ELISA终止液（可提供标记服务）
AEC显色试剂盒（20×）（可提供标记服务）
蛋白印迹膜再生液（可提供标记服务）
植物蛋白抽提试剂（可提供标记服务）
ELISA包被液（可提供标记服务）
BCIP/NBT碱性磷酸酯酶显色试剂盒（40×）（可提供标记服务）
Western Blot内参阳性对照（可提供标记服务）
包涵体蛋白溶解液（可提供标记服务）
0.5M DTT（可提供标记服务）
ELISA血清封闭液（可提供标记服务）
单组份BCIP/NBT显色试剂（可提供标记服务）
PVDF膜（0.22μm）（可提供标记服务）

大鼠白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠胰岛素自身抗体(IAA)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)elisa kits试剂盒 免费代测
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大鼠载脂蛋白H(ApoH)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠肾上腺髓质素(ADM)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠β内啡肽受体(βEPR)elisa kits试剂盒 免费代测
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大鼠烟碱型乙酰受体(NAChR)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠毒蕈碱型乙酰受体(MAChR)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠活化蛋白C(APC)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠甘丙肽/甘丙素(GAL)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠α葡萄糖苷酶(αglucosidase)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠破骨细胞分化因子(ODF)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠Toll样受体9(TLR9/CD289)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠可溶性Toll样受体2(sTLR2)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠前列腺素F2α(PGF2α)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠白三烯E4(LTE4)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠(UK)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠碱性磷酸酶(ALP)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠血管生成素4(ANG4)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠缪勒管抑制物质/抗缪勒管激素(MIS/AMH)elisa kits试剂盒 免费代测
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大鼠红细胞生成素受体(EPOR)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)elisa kits试剂盒 免费代测
大鼠血管内皮细胞生长因子D(VEGFD)elisa kits试剂盒 免费代测

SDS（可提供标记服务）
1M Tris-Cl (pH7.5)（可提供标记服务）
改良型苏木素（可提供标记服务）
PVDF膜（0.45μm）（可提供标记服务）
PMSF (100mM)（可提供标记服务）
10% SDS（可提供标记服务）
蛋白酶抑制剂混合物（100×）（可提供标记服务）
TEMED（可提供标记服务）
柠檬酸盐缓冲液（100×，pH6.0）（可提供标记服务）
细胞消化液（可提供标记服务）
EDTA缓冲液（50×，pH9.0）（可提供标记服务）
显影定影试剂盒（可提供标记服务）
磷酸酯酶抑制剂（100 mM）（可提供标记服务）
（可提供标记服务）
封闭用正常山羊血清（可提供标记服务）
X线暗盒（可提供标记服务）
Tris（三羟甲基氨基甲烷）（可提供标记服务）
内源性过氧化物酶封闭液（可提供标记服务）
X光胶片（可提供标记服务）
内源性碱性磷酸酶封闭液（可提供标记服务）
Jurkat全细胞裂解液（可提供标记服务）
293T全细胞裂解液（可提供标记服务）
免疫组化抗体稀释液（绿色）（可提供标记服务）
MOLT-4全细胞裂解液（可提供标记服务）
Biotin标记抗体稀释液（黄色）（可提供标记服务）
K562全细胞裂解液（可提供标记服务）
HRP标记抗体稀释液（红色）（可提供标记服务）
COLO全细胞裂解液（可提供标记服务）
多聚赖氨酸（10×）（可提供标记服务）
CTACK/CCL27检测试剂盒EL-4全细胞裂解液（可提供标记服务）
APES（50×）（可提供标记服务）
NIH3T3全细胞裂解液（可提供标记服务）
防脱载玻片（可提供标记服务）
测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.温浴
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。