人脑静脉血管内皮细胞 返回列表页

操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

       产品描述：公司提供的原代细胞均来自新鲜组织，公司提供的人源原代细胞均来自新鲜组织，用于培养该细胞的组织采集是根据标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞的污染，同时保证质量的稳定。在公司技术部标准的操作流程下，原代细胞可以保持分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。

      发货：客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。公司提供的细胞有标准的鉴定流程，保证细胞的纯度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右*培养基；2、说明书及注意事项；3、公司售后服务标准。

      保存和应用：客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞，如是新鲜原代细胞，客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h，再进行后续的实验操作。如是冻存细胞，客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研，不得用于临床应用。

注意事项：
1. 接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。

培养步骤：

对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

H-D-ALA-OBZL P-TOSYLATE磺酸达氟沙星-丹诺沙星,纯品型，标准品anti- BMP4 antibody人超敏前列腺特异性抗原(PSA-U S)ELISA试剂盒

(+)-Usniacin磺胺苯吡唑标准品anti- BMP7 antibody人苯酸诺龙/苯酸去睾酮(NP)ELISA试剂盒

;磺胺氧哒嗪标准品anti- BMP9 antibody人16α羟基雌酮1(16-α OHE-1)ELISA试剂盒

D-Proline;(R)-Pyrrolidine-2-carboxylic acid;(R)-(+)-Proline;D-Pro三水合物标准品-(羟氨苄)anti- BMPR1A antibody人状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)ELISA试剂盒

D-Fructose-1,6-diphosphate trisodium salt octahydrate班布特罗盐酸盐标准品anti- BMPR2 antibody人状腺素抗体(TAb)ELISA试剂盒

D-FRUCTOSE 6-PHOSPHATE DISODIUM SALT磺胺标准品anti- BMPR2 antibody人半蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA试剂盒

D-Ribose代谢物标准品anti- BMSC UbP antibody人性激素结合球蛋白(SHBG)ELISA试剂盒

D-Cyclopentylglycine标准品anti- B-Myb antibody人脱表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA试剂盒

人脑静脉血管内皮细胞Human NF-κB p65 (Nuclear Factor Kappa B p65) ELISA Kit补体C1qα链多肽抗体anti- RAB34 antibody免疫球蛋白结合蛋白1(IGBP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Human MART/Melan-A (Melanoma Marker A) ELISA Kit补体C1qγ链多肽抗体anti- RAB35 antibody黄体激素(LH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Human MAGE (Melanoma-associated Antigen) ELISA Kit钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶抗体anti- RAB37 antibody微管关联蛋白τ(MAPτ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Human MMSAM (Melanoma Metastasis Surface Adhesion Molecule) ELISA Kit 老年痴呆相关类钙粘蛋白CS2抗体anti- RAB38 antibody微管关联蛋白τ(MAPτ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Human βMSH (beta-Melanocyte Stimulating Hormone) ELISA Kit细胞质多聚腺苷酸结合蛋白3抗体anti- RAB39 antibody血幼素(HJV)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Human MLZE (Melanoma Derived Leucine Zipper Extra Nuclear Factor) ELISA KitComplexin I/复合素1抗体anti- RAB39B antibodyⅡ型胶原α1(COL2α1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Human ESF (Erythropoiesis Stimulating Factor) ELISA KitCD30抗体anti- RAB3A antibody乙醇脱酶1(ADH1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Human EMP (Erythrocyte Membrane Protein) ELISA Kit细胞角蛋白19，17，14，42，10抗体anti- RAB3A-specific antibody线粒体乙醛脱酶(ALDM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)