大鼠滑膜细胞 返回列表页

收到细胞如何处理？

1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。

       产品描述：公司提供的原代细胞均来自新鲜组织，公司提供的人源原代细胞均来自新鲜组织，用于培养该细胞的组织采集是根据标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞的污染，同时保证质量的稳定。在公司技术部标准的操作流程下，原代细胞可以保持分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。

      发货：客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。公司提供的细胞有标准的鉴定流程，保证细胞的纯度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右*培养基；2、说明书及注意事项；3、公司售后服务标准。

      保存和应用：客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞，如是新鲜原代细胞，客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h，再进行后续的实验操作。如是冻存细胞，客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研，不得用于临床应用。

细胞培养步骤：

一．培养基及培养冻存条件准备：
1） 准备DMEM-H培养基(GIBCO,货号1199500bt，添加NaHCO3 1.5g/L)，90%；胎牛血清，10%。也可根据实验需要选择悬浮培养基，使293T细胞悬浮生长。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3） 冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二． 细胞处理：
1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
冷冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

Fast blue B salt;Fast blue salt BN;o-Dianisidine tetrazotized;Dianisidine blue;Azoic diazo coMponent 48;Di-o-anisidine diazotatezinc double salt;Tetrazotized di-2-anisidine,ZnCl2;Echtblausalz B;Naphthanil diazo blue B salt醇中地克松标准品anti- CGGBP1 antibody小鼠型(GSGS)ELISA试剂盒

NA环已烷中萎锈灵标准品anti- CGNL1 antibody小鼠还原型(GSH)ELISA试剂盒

Coronene菌核净溶液标准物质anti- CGRP-II antibody小鼠肌钙蛋白T(Tn-T)ELISA试剂盒

DL-Cystine;腈中恶霜灵标准品anti- CGRRF1 antibody小鼠c-fos ELISA试剂盒

Silicon醇中恶霜灵标准品anti- CHAC2 antibody小鼠c-jun ELISA试剂盒

NA异辛烷中恶霜灵标准品-（杀矾)anti- CHAD antibody小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒

Disodium pytophosphate醇中精霜灵标准品 ,anti- CHAF1A antibody小鼠粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISA试剂盒

SODIUM METASILICATE NONAHYDRATE酮中精霜灵标准品anti- CHAT antibody小鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)ELISA试剂盒

大鼠滑膜细胞Human PTF1α (Pancreas Specific Transcription Factor 1α) ELISA Kit 线粒体2,4-双烯酰还原酶1抗体anti- Serum amyloid P component antibody半乳糖-1-酸尿苷酰转移酶(GALT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Human REG1α (Regenerating Islet Derived Protein 1 Alpha) ELISA Kit Dab2相互作用蛋白抗体anti- SESN1 antibody肿瘤坏死因子受体超家族成员10A(TNFRSF10A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Human REG4 (Regenerating Islet Derived Protein 4) ELISA Kit 信号转导功能蛋白DAB2抗体anti- SESN1 antibody血清淀粉样蛋白A2(SAA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Human SULT1A1 (Sulfotransferase 1A1) ELISA Kit细胞命运决定因子DACH1抗体anti- SESN3 antibody酸二酯酶12(PDE12)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Human PL (Pancreatic Lipase) ELISA Kit热休克蛋白家族40抗体anti- SESN3 antibodyS100钙结合蛋白A14(S100A14)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Human PTPN11 (Protein Tyrosine Phosphatase, Non Receptor Type 11) ELISA Kit GTP发育调控结合蛋白1抗体anti- Sestrin 2 antibody原A(PGA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Human OSM (Oncostatin M) ELISA Kit 细胞骨架4.1蛋白家族DAL1抗体anti- Sestrin 2 antibody泛素羧基端酯酶L1(UCHL1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Human DCN (Decorin) ELISA Kit跨膜蛋白16A/钙激活氯离子通道抗体anti- SET antibody嗜酸性粒细胞过物酶(EPX)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

公司产品采用干冰运输，经过逐步的降温，冷藏在-196℃度的液氮罐中，暂时停止其生命活动，保存其活性，使您的实验更生动,公司代理品牌有：ATCC、sciencell、ICLC、GIBCO、IST-Banca等品牌.

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