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产品描述:公司提供的原代细胞均来自新鲜组织,公司提供的人源原代细胞均来自新鲜组织,用于培养该细胞的组织采集是根据标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件,以降低杂细胞的污染,同时保证质量的稳定。在公司技术部标准的操作流程下,原代细胞可以保持分化状态,进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。
发货:客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。公司提供的细胞有标准的鉴定流程,保证细胞的纯度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右*培养基;2、说明书及注意事项;3、公司售后服务标准。
保存和应用:客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞,如是新鲜原代细胞,客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h,再进行后续的实验操作。如是冻存细胞,客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研,不得用于临床应用。
产品名称 | 大鼠淋巴成纤维细胞 |
规格 | 5×105 |
货号 | XG-X6580 |
培养步骤:
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
注意事项:
1. 接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
AMMONIUM CERIUM(IV) SULFATE TETRAHYDRATE醇中6种酚类混合溶液标准物质anti- Cryptochrome 1 antibody小鼠髓脂性蛋白(MBP)ELISA试剂盒
TITANIUM(IV) SULFATE醇中3种酚类混合溶液标准物质anti- Cryptochrome 2 antibody小鼠转化生长因子α(TGF-α)ELISA试剂盒
Ammonium ferric sulfate dodecahydrate烷混合溶液标准物质anti- CRYZL1 antibody小鼠种胎儿球蛋白/胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒
MERCUROUS SULFATE醇中5种卤代烃混合溶液标准物质anti- CSAD antibody小醇中三卤鼠前列腺酸性酸酶(PAP)ELISA试剂盒
TITANIUM (III) SULFATE异辛烷中8种有机氯药混合溶液标准物质anti- CSDE1 antibody小鼠前列腺特异性抗原(PSA)ELISA试剂盒
Ferrous aluM;Ferrous aMMoniuM sulfate;Mohr'salt异辛烷中十溴联苯溶液标准物质anti- CSE1L antibody小鼠卵巢癌标志物CA125ELISA试剂盒
Stannous sulfate苯中十溴联苯溶液标准物质anti- CSF2RA/CD116 antibody小鼠乳腺癌标志物-CA153ELISA试剂盒
NA异辛烷中六溴苯溶液标准物质anti- CSGALNACT2 antibody小鼠胃肠癌标志物CA199ELISA试剂盒
大鼠淋巴成纤维细胞Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..上皮细胞癌转化蛋白2抗体anti- SPACA1 antibody肽酶抑制因子Kunitz型2(SPINT2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..真核翻译起始因子4B抗体anti- SPACA3 antibodyNADP依赖性苹果酶2(ME2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens, human酸化转录接头蛋白EP300抗体anti- SPAG11A antibody干扰素γ诱导单核因子(MIγ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Phialophora verrucosa Medlar, anamorph酸化转录因子E2F-1抗体anti- SPAG16 antibody赖氨酰酶样蛋白2(LOXL2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Phytophthora boehmeriae Sawada酸化表皮生长因子受体抗体anti- SPAG4L antibody原钙黏素γA2(PCDHγA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Umbelopsis isabellina (Oudemans) Gams酸化雌激素受体α抗体anti- SPAG4-Specific antibody赖氨酰酶样蛋白1(LOXL1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..酸化真核翻译起始因子4B抗体anti- SPAG5 antibodyⅦ(F7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..酸化真核翻译起始因子4G抗体anti- SPAG6 antibody心脏肌球蛋白结合蛋白C(MYBPC3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
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