小鼠角膜组织提取物 返回列表页

公司产品采用干冰运输，经过逐步的降温，冷藏在-196℃度的液氮罐中，暂时停止其生命活动，保存其活性，使您的实验更生动,公司代理品牌有：ATCC、sciencell、ICLC、GIBCO、IST-Banca等品牌.

小鼠角膜组织提取物【Eye: Normal Mouse Corneal Derivatives】
角膜组织是是位于眼球前壁的一层透明膜，为眼睛提供大部分屈光力。公司科技提供来自新鲜或冷冻小鼠角膜组织中高质量的总RNA，PCR准备的条cDNA链，蛋白质及其亚组分。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。
总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。公司提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。

cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。

蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备小鼠角膜组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。

潜在的应用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA选择性剪接；<3>基因克隆与目标测序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白检测与蛋白质组学；<6>芯片研究与表达图谱。

细胞培养步骤：

一．培养基及培养冻存条件准备：
1） 准备DMEM-H培养基(GIBCO,货号1199500bt，添加NaHCO3 1.5g/L)，90%；胎牛血清，10%。也可根据实验需要选择悬浮培养基，使293T细胞悬浮生长。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3） 冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二． 细胞处理：
1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
冷冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

CefMetazole蛋白激酶A锚定蛋白95抗体anti- NDUFB2 antibody血小板生成素(TPO)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Cefoperazone DihydrateApollon凋亡抑制蛋白抗体anti- NDUFB3 antibody肿瘤坏死因子β(TNFβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

CefotaxiMe SodiuMα-连环蛋白抗体（钙粘蛋白相关蛋白）Catenin αanti- NDUFB5 antibody组织金属蛋白酶抑制因子4(TIMP4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Cefotetan自噬相关蛋白9B抗体anti- NDUFB6 antibody组织金属蛋白酶抑制因子4(TIMP4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

CefpiraMide自噬相关蛋白12抗体anti- NDUFB7 antibody组织金属蛋白酶抑制因子3(TIMP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

CeftazidiMe Pentahydrate自噬相关蛋白13抗体anti- NDUFB8 antibody组织金属蛋白酶抑制因子3(TIMP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Ceftriaxone SodiuM自噬相关蛋白3抗体anti- NDUFB9 antibody组织金属蛋白酶抑制因子2(TIMP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

CefuroxiMe SodiuMG1氨基酸A型受体相似蛋白2抗体anti- NDUFC1 antibody组织金属蛋白酶抑制因子2(TIMP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

小鼠角膜组织提取物Tetrahymena thermophila Nanney and McCoyO位N-酰葡萄糖胺OGT抗体Human CHAD(Chondroadherin) ELISA Kit胰岛素样生长因子结合蛋白7试剂盒

Agaricus bisporus (Lange) Imbach, teleomorph寡腺苷酸合成酶-1Human YIF1B(Protein YIF1B) ELISA Kit胰岛素样生长因子结合蛋白5试剂盒

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hanse ..脱羧酶抗体Human DMD(Dystrophin) ELISA Kit胰岛素样生长因子结合蛋白4试剂盒

Aspergillus anomalus Pidoplichko et Kirilen ..水稻白叶枯病菌Os05g0477200蛋白抗体Human SLC50A1(Sugar transporter SWEET1) ELISA Kit胰岛素样生长因子结合蛋白3试剂盒

Homo sapiens, human类粘蛋白2抗体Human PSIP1(PC4 and SFRS1-interacting protein) ELISA Kit胰岛素样生长因子结合蛋白2试剂盒

Homo sapiens, human骨硬化病相关跨膜蛋白1抗体Human ATG5(Autophagy protein 5) ELISA Kit胰岛素样生长因子结合蛋白1试剂盒

Fusarium oxysporum Schlechtendahl, anamorph紧密连接蛋白/小分子胶原蛋白OCEL1抗体Human CNP(2',3'-cyclic-nucleotide 3'-phosphodiesterase) ELISA Kit胰岛素样生长因子2受体试剂盒

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hanse ..富含突触相关蛋白SHANK3抗体Human TAGLN3(Transgelin-3) ELISA Kit胰岛素样生长因子2试剂盒

收到细胞如何处理？

1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。