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小鼠小肠组织提取物

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所  在  地上海市

更新时间:2020-10-26 20:29:49浏览次数:201次

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小鼠小肠组织提取物
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小鼠小肠组织提取物【Mouse Intestine: Normal Small Intestinal Derivatives】
小肠是消化管中长的一段,是进行消化吸收的重要部分。公司科技提供来自新鲜或冷冻小鼠小肠组织中高质量的总RNA,PCR准备的条cDNA链,蛋白质及其亚组分。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆,表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。
总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。公司提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。

cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证了产品的质量。

蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备小鼠小肠组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。

潜在的应用: <1>已知基因的PCR克隆;<2>mRNA选择性剪接;<3>基因克隆与目标测序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白检测与蛋白质组学;<6>芯片研究与表达图谱。

产品名称

 小鼠小肠组织提取物

 规格

 详见说明书

 货号

 XG-X7009

 

操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
注意事项:
1. 接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。 

ETHYLENEDIAMINETETRAACETIC DIANHYDRIDE锚蛋白重复结构域蛋白9抗体anti- MRPL52 antibody高分子量激肽原(HMWK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

ETHYLENEDIAMINETETRAACETIC ACID DISODIU&锚蛋白重复及SAM结构域蛋白1A抗体anti- MRPL53 antibody转铁蛋白(TRF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Ethylenediaminetetraacetic acid tetrasodium salt脂肪特定转录因子2抗体anti- MRPL55 antibody丰富α2-糖蛋白1(LRG1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

PAMAM DENDRIMER, GENERATION 5 SOLUTION 5 WT. % IN METHANOL载脂蛋白L3抗体anti- MRPL9 antibodyα2-HS糖蛋白(αHSG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Ethylene glycol diacetate肿瘤/丸抗原81抗体anti- MRPP3 antibody抑制素B(INHB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

OxaMide;Oxalic acid diaMide; Ethanedioic acid diaMide; EthanediaMide; OxalaMide;共济失调蛋白7样2抗体anti- MRPS10 antibody胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Ethyl 4-bromobutyrate砷酸盐耐药蛋白ARS2抗体anti- MRPS11 antibodyⅠ型胶原α2(COL1α2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

ETHYL METHYL KETONE 2,4-DINITROPHENYLHYDRAZONE芳香基硫酸酯酶1抗体anti- MRPS12 antibodyⅠ型胶原α2(COL1α2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

小鼠小肠组织提取物Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..神经母细胞瘤源性分泌蛋白抗体Human RBM3(Putative RNA-binding protein 3) ELISA Kit血小板激活因子酰水解酶2(PAFAH2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..核因子1B抗体Human CRBN(Protein cereblon) ELISA Kit淀粉样蛋白β前体蛋白结合蛋白B3(APBB3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Homo sapiens, human维酸诱导神经母细胞瘤蛋白1抗体Human POTE-B(Ankyrin Domain Family Member B) ELISA Kit淀粉样蛋白β前体蛋白结合蛋白2(APPBP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..转录延伸因子NELF抗体Human PIGR(Polymeric Immunoglobulin Receptor/Membrane Secretory Component) ELISA Kit鞘氨醇1酸酯受体1(S1PR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..蛋白激酶C结合蛋白NELL1抗体Human GCA(Grancalcin) ELISA Kit90kDa热休克蛋白αA1(HSP90αA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Polyporus guianensis蛋白激酶C结合蛋白NELL2抗体Human SARDH(Sarcosine dehydrogenase, mitochondrial) ELISA Kit90kDa热休克蛋白αB1(HSP90αB1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Aspergillus flavus Link var.flavus , ana ..核因子1A抗体Human TCN2(Transcobalamin-2) ELISA Kit90kDa热休克蛋白αB1(HSP90αB1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Dictyostelium discoideum Raper环一螺旋蛋白1抗体Human GNMT(Glycine N-methyltransferase) ELISA Kit可的松(COR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

培养步骤:

对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

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