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货号 | XG-X3311 | 生长特性 | 贴壁生长 |
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细胞形态 | 上皮细胞样 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
运输和保存:
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
商品信息:
名称产品 | HCC1937人乳腺癌细胞 | 产品别称 | HCC-1937 |
种属 | 人 | 生长特性 | 贴壁细胞 |
换液频率 | 2-3次/周 | 细胞形态 | 上皮细胞样 |
货号 | XG-X3311 | 组织来源 | 乳房;原发性导管癌;3级,ⅡB期 |
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度:液氮
培养条件
气相:空气,95%;CO2,5%
温度:37℃
推荐传代比例 1:2-1:4
背景描述 HCC1937细胞1995年10月13日最初来源于原发性导管癌,用了11.5个月建株。肿瘤分类为TNMⅡB期,3级。BRCA1分析表明,HCC1937细胞是BRCA 15382C突变纯合的,而来源于同一病人的类淋巴母细胞细胞株在这个突变位点上是杂合的。另两个家庭成员也有这个突变;一个同卵双生姐妹也患有乳腺癌。HCC1937细胞有一个后天的Tp53突变,而其野生型等位基因丢失;一个PTEN基因的后天的纯合缺失,以及多个与乳腺癌发病机理相关的位点上发生的杂合突变。HCC1937细胞Her2-neu和p53表达都呈阴性。HCC1937细胞的上皮细胞特异性标志上皮细胞糖蛋2(EGP2)和细胞角蛋白19都呈阳性;雌激su受体(ER)和孕酮(PR)表达阴性。
年龄(性别) 女;23岁
组织来源 乳房;原发性导管癌;3级,ⅡB期
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 乳腺癌细胞
生物安全等级 1
倍增时间 ~50-60 hours
受体表达情况 estrogen receptor, negative;progesterone receptor, negative
基因表达情况 Epithelial glycoprotein 2 (EGP2); cytokeratin 19
保藏机构 ATCC; CRL-2336 DSMZ; ACC-513
细胞接收后的处理:
1)收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
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细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加入0.25%(w / v)-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3. 轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
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