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抗体的鉴定:
1)抗体的效价鉴定:鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。
2)抗体的特异性鉴定:抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。
3)真核翻译起始因子2C2抗体的亲和力:是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。
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英文名称 Anti-phospho-PRKCQ(Ser695)
中文名称 磷酸化蛋白激酶C theta抗体
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Mouse, Rat
产品类型 一抗 磷酸化抗体
研究领域 肿瘤 免疫学 信号转导 激酶和磷酸酶
蛋白分子量 predicted molecular weight: 82kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human PRKCQ around the phosphorylation site of Ser695
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
别 名 PRKCQ(phospho S695); PKCθ(Phospho-Ser695); PKC theta(phospho S695); PKC 0; PRKCQ; PKC0; Prkcq; PRKCT; Protein kinase C theta; Protein kinase C theta type; Protein Kinase Ctheta; KPCT_HUMAN; nPKC theta; nPKC-theta; nPKCtheta.
抗体制备过程:
1.材料与试剂
a.提取的动物 Ig
b.弗氏*佐剂和弗氏不*佐剂
c.和
d.实验动物 兔
e.其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,杀死实验活体,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清(无菌采制)
NCI-H205(人肾上腺腺瘤细胞)5×106cells/瓶×2
Tca-8113(人舌鳞细胞)5×106cells/瓶×2
改良MRS酸菌琼脂培养基/改良MRS琼脂培养基/MRS Lactotacillus Agar Modified酸菌的测定,双歧杆菌和嗜酸酸菌的计数250克国产/进口
MDA-MB-468(人腺细胞)无色透链霉菌 Streptomyces hyalinum
索氏梭菌 Clostridium sordellii气单胞菌属 Aeromonas sp.
Nitsch培养基(含维生素)/Nitsch Medium with vitaminsBR10升国产/进口
碱性蛋白胨水/3%钠碱性蛋白胨水/Alkaline Peptone Water副溶血性弧菌的选择性增菌培养250克国产/进口
SIM动力培养基/SIM培养基/Motility Test Medium(Semisolid)李氏菌动力观察,H抗原位相变异试验;硫氢、动力、吲哚试验250克国产/进口
明胶/白明胶/动物胶/筋胶/银明胶/食用明胶/GelatinCP500克国产/进口
嗜酸杆菌 Lactobacillus acidophilusHET-1A, 人食管上皮细胞
中慢生华癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii异常汉逊酵母 Hansenula anomala
磷酸化蛋白激酶C theta抗体伊立康;Iritecan hy CAS 100286-90-6 规格: 20mg 订购|咨询
洋参对照药材 CAS 规格: 1g 订购|咨询
独活对照药材 CAS 规格: 1g 订购|咨询
芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷 CAS 29741-09-1 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
澳洲茄胺;澳州茄胺 CAS 126-17-0 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
甲基异茜草素 CAS 117-02-2 规格: 20mg 订购|咨询
禾草灵;纯品型;标准品;有证书 CAS 40843-25-2 规格: 0.1g 订购|咨询
白头翁对照药材 CAS 规格: 1g 订购|咨询
鲁斯考皂苷元; 鲁斯可皂苷元 CAS 472-11-7 规格: HPLC≥98%,20mg/支 订购|咨询
人参皂苷Rgl CAS 规格: 20mg 订购|咨询
β-胡萝卜素 CAS 7235-40-7 规格: 20mg 订购|咨询
实验原理 :
(1)特异性结合抗原:抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞,通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致病理损伤。然而,抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合,直接发挥中和病毒的作用。
(2)激活补体:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。
(3)结合细胞:不同类别的免疫球蛋白,可结合不同种的细胞,参与免疫应答。
(4)可通过胎盘及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成自然被动
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗体分子是一种蛋白质,也具有刺激机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同:不耐热,60~70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质,均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白,再经透析法将其纯化。
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