磷酸化蛋白激酶C亚型G抗体 返回列表页

抗体的定义：
抗体（antibody），（免疫球蛋白不仅仅只是抗体）是一种由浆细胞（效应B细胞）分泌，被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质，仅被发现存在于脊椎动物的血液等体液中，及其B细胞的细胞膜表面。抗体能识别特定外来物的一个*特征，该外来目标被称为抗原。
动物抗体功能分类：
①猪抗体：猪瘟抗体，猪蓝耳抗体，猪圆环病毒抗体，猪伪狂犬抗体，猪细小病毒抗体，猪口蹄疫抗体，猪流感抗体等。
②禽抗体:小鹅瘟抗体，鸭肝抗体抗体，鸭浆膜炎抗体，禽流感抗体，新城疫抗体等
③牛抗体：牛口蹄疫抗体，奶牛乳房炎抗体，牛流行热抗体，牛病毒性腹泻抗体，牛出血性败血症抗体等
④羊抗体：羊痘抗体，羊口蹄疫抗体，羊小反刍兽疫抗体，羊快疫抗体，羊肠毒血症抗体，羊猝疽抗体，羊黑疫抗体等。
⑤犬抗体：犬狂犬病抗体、犬瘟热抗体、犬副流感抗体、犬腺病毒抗体与犬细小病毒病抗体，狐貉水貂的伪狂犬抗体、细小病毒抗体、乙脑抗体等。 

磷酸化蛋白激酶C亚型G抗体产品应用   
英文名称   Anti-Phospho-PKC gamma (Thr674)
中文名称  磷酸化蛋白激酶C亚型G抗体
别    名  PKCC; PKCG; PRKCG; Protein kinase C gamma; Protein kinase C gamma polypeptide; Protein kinase C gamma type; SCA 14; SCA14; KPCG_HUMAN.
浓    度   1mg/1ml
规 格  0.1ml/100μg
抗体来源  Rabbit
克隆类型  polyclonal
交叉反应    Human, Mouse, Rat, Sheep
产品类型      一抗 磷酸化抗体
研究领域    肿瘤 细胞生物 免疫学 信号转导 转录调节因子 激酶和磷酸酶
蛋白分子量   predicted molecular weight: 78kDa
性    状   Lyophilized or Liquid
免 疫 原  KLH conjugated synthesised phosphopeptide derived from human PKC gamma around the phosphorylation site of Thr674
亚    型  IgG
纯化方法   affinity purified by Protein A
储 存 液  0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
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抗体的制备过程：
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白，通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白，纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原，常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等，大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血，家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血，家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化，利用偶联了抗原的亲和柱进行层析，具有高效，特异性强，纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价，而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
免疫荧光技术的实验步骤：
一、准备好试剂与仪器：
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，十分钟后弃去，使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其*覆盖标本，置于有盖搪瓷盒内，保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后，再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分钟，并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。

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