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上海徽涛自动化设备有限公司
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体外哺乳动物细胞染色体畸变试验仪
2025-4-28 阅读(17)
体外哺乳动物细胞染色体畸变试验仪
一、 仪器介绍
实验目的：
本试验检测受试物是否引起培养的哺乳动物细胞染色体畸变,以评价受试物致突变的可能性
实验概述：
在加入和不加入代谢活化系统的条件下,使培养的哺乳动物细胞暴露于受试物中。用中期分裂相阻断剂(如秋水仙素或秋水仙胺)处理,使细胞停止在中期分裂相,随后收获细胞,制片,染色,分析染色体畸变。
大部分的致突变剂导致染色单体型畸变,偶有染色体型畸变发生。虽然多倍体的增加可能预示着有染色体数目畸变的可能,但本方法并不适合用于测定染色体的数目畸变。
应用范围
应用于科研、农业、卫生、教育、雾霾状态可吸入颗粒染毒效果研究等各个领域
二、试验流程
1）细胞培养
选择合适细胞系，在含血清培养基中培养至对数生长期。
2）受试物处理
设置多个浓度组(需包括细胞毒性评估，如50%生长抑制浓度)
阳性对照
阴性对照(溶剂对照)
3.）代谢活化系统（S9混合液）
模拟体内代谢，用于检测需代谢激活的致突变物(如加Aroclor 1254诱导的大鼠肝S9)
4.）采样时间
短期处理:1个细胞周期(通常24小时，含或不含S9)
长期处理:覆盖多个细胞周期(如48小时)
5）染色体制备
秋水仙素(或秋水仙胺)处理:阻断中期细胞。
低渗处理(KCI溶液)使细胞膨胀。
固定(甲醇:冰醋酸=3:1)后滴片，Giemsa染色。
6）镜检分析
显微镜下观察至少200个中期分裂相，记录畸变类型和频率。
三、仪器与试剂
关键仪器：
培养箱、生物安全柜、离心机、显微镜(配备油镜和图像分析系统)
染色体自动扫描仪(可选)
主要试剂:
细胞培养基、胎牛血清
秋水仙素、Giemsa染液、S9混合液。
