注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

原理是由一对引物介导，能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增，经过n个热循环扩增，扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0＜E＜1,扩增效率＝倍，使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
​
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

786-O(人肾透明细胞细胞)5×106cells/瓶×2

大鼠肺微血管内细胞*培养基100mL

膨端青霉 Penicillium inflatum苜蓿中华瘤菌 Sinorhizobium meliloti

嗜酸杆菌 Lactobacillus acidophilusNRK-52E，大鼠肾细胞

奈正青霉 Eupenicillium sinaicum人支气管平滑肌细胞*培养基

酸菌体培养基/Lactobacillus Fluid Medium250克国产/进口

SW1116(人结肠腺细胞)5×106cells/瓶×2

3.5% NaC1甘露醇发酵管BR20支国产/进口

人小梁网细胞*培养基100mL

KU812(人外周血嗜碱性白血病细胞)大豆慢生瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

HLF-a(人肺细胞)5×106cells/瓶×2

脑多头囊虫PCR检测试剂盒规格大鼠膀胱成纤维细胞*培养基100mL

胰凝蛋白酶(含100mL酶解缓冲液)10mL

改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨汤(MLST) 规格： 250g 用途： 用于奶粉中阪崎肠杆菌的检验的增菌和分子生物学检验方法（PCR）选择性增菌(GB 4789.40-2010和SN1...

肌红蛋白(MYO)天然蛋白   Native Myoglobin (MYO)

肠碱性磷酸酶(ALPI)重组蛋白  Recombinant Alkaline Phosphatase, Intestinal (ALPI)

基质细胞衍生因子4(SDF4)重组蛋白  Recombinant Stromal Cell Derived Factor 4 (SDF4)

肾上腺素能受体α1A(ADRα1A)重组蛋白  Recombinant Adrenergic Receptor Alpha 1A (ADRa1A)

粘蛋白2(MUC2)重组蛋白  Recombinant Mucin 2 (MUC2)

JAR(人胎盘绒毛膜细胞)5×106cells/瓶×2

MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨细胞前体细胞)5×106cells/瓶×2

卵巢  A2780

人食管细胞  KYSE450

小鼠骨瘤  LM-8

无菌兔血清/Sterile Defidrinated Rabbit BloodBR100/400毫升国产/进口

磷酸盐葡萄糖胨水培养基/磷酸盐葡萄糖蛋白胨水培养基/Phosphate Glucose Peptone Water用于红试验250克国产/进口

氨基酸脱羧酶对照发酵管BR20支国产/进口

技术原理：
 DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
       在聚合酶链式反应实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。（ DNA高温变性低温复性）
       发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。