目录:上海帛科生物技术有限公司>>PCR试剂盒>>PCR检测试剂盒>> 50次埃可病毒PCR检测试剂盒说明书
原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0<E<1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
埃可病毒PCR检测试剂盒说明书 | ECHO VirusRTPCR | BK-P9088 |
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
技术原理:
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性)
发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。
棕榈酸 CAS 21096 * 规格: 20mg
银锻苷 CAS 20316-62-5 * 规格: 20mg
异乌药内酯 CAS 728-61-0 * 规格: 20mg
五味子醇甲 CAS 7432-28-2 * 规格: 20mg
商陆皂苷甲 CAS 65497-07-6 * 规格: 20mg
25-甲氧基-原人参三醇 CAS * 规格: 10mg
桤木 CAS 33457-62-4 * 规格: 20mg
泊金丁 CAS 94-26-8 * 规格: 20mg
甾醇 CAS 57-87-4 * 规格: 20mg
去甲泽拉木醛 CAS 107316-88-1 * 规格: 20mg
姜 CAS 122-48-5 * 规格: 20mg
环氧泽泻烯 CAS 87701-68-6 * 规格: 20mg
瓜子金皂苷己 CAS * 规格: 20mg
番泻苷D CAS 37271-17-3 * 规格: 10mg
莪术烯 CAS * 规格: 20mg
埃可病毒PCR检测试剂盒说明书氟氢钾 78.1 Potassium fluoride*:7789-29-9分子量: KHF2
2-溴甲醚 187.03 2- bromo ether*:578-57-4分子量: C7H7BrO
2-溴-4--5-嘧 199.01 2- bromo -4- amino -5- cyano pyrimidine*:94741-70-5分子量: C5H3BrN4
2--3,6-二氟-4-(三氟甲)吡 198.09 2- -3,6- two -4- (three f)*:675602-89-8分子量: C6H3F5N2
酞菁镁(II) Magnesium phthalocyanine (II) 536.84分子量: C32H16MgN8*:1661-03-6
二氯酞菁锡(IV) Two tin phthalocyanine tin (IV) 702.15分子量: C32H16Cl2N8Sn*:18253-54-8
氯聚乙 Chlorinated polyethylene 分子量:*:63231-66-3
4-(二甲)吡-N-氧物水合物 138.17 4- (two a) pyridine -N- oxide hydrate*:1005-31-8分子量: C7H10N2O·xH2O
3-喹啉 144.17 3- amino group*:580-17-6分子量: C9H8N2
2,5-双(1-萘)-1,3,4-恶二唑 322.36 Double 2,5- (1- naphthyl) -1,3,4- two with evil*:905-62-4分子量: C22H14N2O
4-氯甲联 202.68 4- Cl*:1667-11-4分子量: C13H11Cl