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| 货号 | BK-01S6474 |
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特别提醒：本产品仅供科研研究使用，不得用于人体临床直接检测。
产品名称：多功能氧化酶(MFO)测试盒微量法
产品规格：100管/96样
检测方法：微量法
产品货号：BK-01S6474
产品分类：氧化与抗氧化系列
商品介绍：
测定意义: 多功能氧化酶又称混合功能氧化酶，可产生降解反应，可使原化学物质变为低毒的或无毒的物质从体内排出；还可产生激活反应，可使原化学物质转化为具有亲电子性质，导致毒性增强，成为致突变物或终致癌物。近年来对混合功能氧化酶系与外源性化学物质相互作用的深入研究，对于从分子生物学水平上进一步了解外源性化学物质的毒作用具有重要意义。 测定原理： MFO催化对硝基苯甲醚产生对硝基，在405nm下有特征吸光值。 自备用品： 分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 |
所需的仪器和用品：
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的测定：
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
样本和试剂浪费！
1、样本制备
① 组织样本： 取约 0.1g 组织（水分充足的样本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4ºC 或冰浴进行 匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min，取上清作为待测液。 【注】：若增加样本量，可按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例进行提取
| ② 细菌/细胞样本： 先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取约 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液，超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）； 12000rpm 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。 【注】：若增加样本量，可按照细菌/细胞数量（10 4）：提取液（mL）为 500~1000：1 的比例进行提取。 ③ 液体样本：直接检测；若浑浊，离心后取上清检测。 |
实验方法学：
一、肝素的配制：
市售肝素冻干粉140单位/mg，1克瓶装，每瓶140，000单位，称取0.1克肝素冻干粉，加生理盐水5ml，配成2800单位/ml。取50～100μl湿润管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不会凝固。老鼠血易凝固，所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉，加3ml生理盐水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制备：取0.1克肝素冻干粉，加2.5ml生理盐水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，湿润管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），横向转动，每隔5～10分钟转动一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集：
全血根据收集的条件，分成不抗凝和抗凝两种。同时，不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清；抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1～2小时，直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血，轻轻颠倒充分抗凝后，可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征，选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。
选择抗凝的注意点：
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致，同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒，充分抗凝，防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多（1ml抗凝全血能分离出0.4～0.5ml血浆）;
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后，解冻时可能会出现絮状浑浊，如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
5g 3- 氨基 -9- 乙基咔唑 AEC (3-Amino-9-Ethylcarbazole) 常温保存
100mL TES Buffer,0.2M,pH7.0 TES Buffer,0.2M,pH7.0 常温保存
100µL 小鼠抗CBP标签单抗 Anti CBP-Tag Mouse MAb -20℃保存
2 ug pTALEN_v2 (NG) pTALEN_v2 (NG) 低温运输，-20℃保存
100g RNCTAB (十六烷基基) 常温
2 ug pDEST20 pDEST20 低温运输，-20℃保存
梭菌鉴别琼脂（DCA） Differentia Clostridial Agar 250g
150mL 丙烯葡聚糖凝胶 S-300 HR Sephacryl S-300 HR 室温保存
TTC TTC 10g
2 g Tocopherol（抗氧化剂） Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
250ml Glycine Buffer in PBS,0.2M,pH2.5 Glycine Buffer in PBS,0.2M,pH2.5 常温保存
多功能氧化酶(MFO)测试盒微量法TRIM36/RNF98 环指蛋白98抗体 规格: 0.2ml
Biglycan 骨/软骨蛋白多糖1抗体 规格: 0.2ml
GM1(GS) 神经节苷酯抗体 规格: 0.1ml
DECTIN-1/CLECSF12/beta Glucan Receptor β葡聚糖受体抗体 规格: 0.1ml
Rabbit Anti-horse IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的兔抗马IgG 规格: 0.1ml
FAM151A FAM151A蛋白抗体 规格: 0.2ml
NME1/Nm23-H1/NDKA 瘤抑制基因抗体 规格: 0.1ml
FAM71A FAM71A蛋白抗体 规格: 0.2ml
srGAP3 神障碍相关GAP蛋白抗体 规格: 0.1ml
Rabbit Anti-horse IgM/PE-Cy7 PE-Cy7标记的兔抗马IgM 规格: 0.1ml
JAMC 连接粘附分子C抗体 规格: 0.2ml
BAGE4 瘤/睾抗原2.4抗体 规格: 0.2ml
注意事项：
1、试剂二为酶，不可冷冻，使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于2，建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用（10μl试剂二原液+60μl蒸馏水）。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管，对照管数值在什么范围？
对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是（1）试剂二或试剂四没有现配现用；（2)没有按顺序加试剂；（3）反应时间不够，可以延长反应时间（反应时间30min可以延长到40min）。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管，可能是样本中杂质的影响太大，为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测，通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。
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