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转基因品系棉花MON15985 PCR试剂盒实验方法步骤

阅读:517      发布时间:2022-8-31
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转基因品系棉花MON15985 PCR试剂盒实验方法步骤:

方法

1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。

2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。

3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。

血平板 (成品培养基)规格: 20个/盒作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验

哥伦比亚血平板(成品培养基)规格: 20个/盒作用: 用于一般病原菌的分离培养和溶血性细菌的鉴别

改良克氏双糖培养基规格: 250g作用: 用于小肠结肠炎耶尔森氏菌的鉴定

硝酸盐蛋白胨水培养基规格: 250g作用: 用于鉴别绿脓杆菌分解硝酸盐产气试验

半固体琼脂规格: 250g作用: 供细菌动力观察、菌种保存,H抗原位相变异试验等。(美国FDA、SN、GB)

3%氯化钠三糖铁琼脂规格: 250g作用: 用于副溶血性弧菌的生化反应。(GB、SN)

血琼脂培养基基础规格: 250g作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验

尿素琼脂培养基基础规格: 250g作用: 用于鉴别肠道菌尿素酶试验

缓冲动力-硝酸盐培养基规格: 250g作用: 供产气荚膜梭菌动力和硝酸盐还原测定用

动力—硝酸盐培养基(A法)规格: 250g作用: 供鉴别测定细菌液化明胶用

明胶培养基(营养明胶)规格: 100g作用: 供测定细菌液化明胶使用

克氏双糖铁琼脂规格: 250g作用: 用于鉴别肠道菌发酵葡萄糖和乳糖,及产生硫化氢的生化反应。(ISO)

缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR-VP培养基、磷酸盐葡萄糖胨水培养基)规格: 250g作用: 用于MR和VP试验

Koser氏枸椽酸盐肉汤规格: 100g作用: 用于细菌的枸橼酸盐的试验

西蒙氏柠檬酸盐培养基规格: 100g作用: 用于肠道菌的柠檬酸盐利用试验



 



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