注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
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实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。
甘胆酸钠 ;甘氨胆酸钠Phospho-HER4/ErbB4 (Tyr984) Antibody3,5-二甲基金刚盐酸盐

甘露；D-甘露糖ALK (31F12) Mouse mAb2-氧代-丁基酸二甲酯

D-半胱氨酸盐酸盐一水CIITA Antibody叔戊氧基

钙蛋白酶抑制剂II(进口)SKAR α/β Antibody三唑钠

炔孕酮/素(标准品)Frizzled5 Antibody甲氨基-甲酸

炔孕酮/素α-Amylase (D55H10) XP® Rabbit mAb异基甲

D-胱氨酸α-Amylase (D55H10) XP® Rabbit mAb6-溴-3,二氢-1H-2-萘酮

DL-色氨酸VIP (D8J1V) Rabbit mAb (IHC Formulad)2,4,6-*酰

DL-丝氨酸Mouse (E1D5H) mAb IgG3 Isotype Control邻羟基对氨基甲酸甲酯

L-蛋氨酸;甲硫氨酸ERp44 (D17A6) XP® Rabbit mAb5-酸吡哆

DL-氨酸ERp44 (D17A6) XP® Rabbit mAb溴-2-氟联

DL-天冬酰，一水MMP-7 (D4H5) XP® Rabbit mAb5,6-二烟酸

DL-氨酸MMP-7 (D4H5) XP® Rabbit mAb1-甲基-咪唑甲酸

DL-酪氨酸PPIG Antibody2-溴-5-甲基噻唑

DL-甲硫氨酸;蛋氨酸Phospho-PPIG (Ser376) Antibody溴甲酯

DL-天冬氨酸Phospho-Rictor (Thr1135) (D30A3) Rabbit mAb溴-2-氟-5-

DL-谷氨酰Phospho-Rictor (Thr1135) (D30A3) Rabbit mAb3,5-二甲基-羟基甲

DL-脯氨酸IRAP Antibody2-哌啶甲酸甲酯

超氧化物歧化酶1,可溶性(SOD1)ELISA试剂盒Phospho-Stat4 (Tyr693)  酸化信号转导和转录激活因子4100 ul

超氧化物歧化酶[锰],线粒体(SOD2)ELISA试剂盒STAT5  信号转导和转录激活因子5100 ul

超敏热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒STAT6  信号转导和转录激活因子6100 ul

超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA试剂盒Stanniocalcin 1  斯钙素100 ul

肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA试剂盒Stra8  视黄酸激活基因8100 ul

叉头框蛋白P3(FoxP3)ELISA试剂盒Astrocy  星形胶质细胞20 ul

层粘连蛋白亚基γ-2(LAMC2)ELISA试剂盒streptomycin  链霉素100 ul

层粘蛋白α1(LAMA1)ELISA试剂盒Survivin  细胞凋亡抑制因子100 ul

层连蛋白/板层素(LN)ELISA试剂盒SUR1  磺酰脲类药物受体1100 ul
鸭瘟病毒(DPV)核酸试剂盒价格热休克蛋白70抗体ent-7α,9-Dihydroxy-15-oxokaur-16-en-19,6β-olide中文名：别名：分子式：C20H26O5

羟类固醇脱氢酶17β抗体（17β-HSD8）ent-11α-Hydroxy-15-oxokaur-16-en-19-oic acid中文名：别名：分子式：C20H28O4

转录因子HES4抗体14-Deoxy-ε-caesalpin中文名：别名：分子式：C24H34O6

造血干细胞特异性相关结合蛋白3抗体Caesalmin B中文名：别名：分子式：C22H28O6

同源盒蛋白HOXC5抗体Caesalmin E中文名：别名：分子式：C26H36O9
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。