注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
​
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。
甘氨鹅脱氧胆酸Dynamin-I (3G4B6) Mouse mAb二基二甲基化铵

牛磺猪去氧胆酸钠TBR1 (D6C6X) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)二月桂酸二丁基锡

磺丁基-β-环糊精;磺丁基倍他环糊精钠Axl (C44G1) Rabbit mAb谷胱甘肽

缬氨霉素Fumarase (D9C5) Rabbit mAb光稳定剂 TH-944

5--1，二甲基吡唑 Phospho-IGF-I Receptor β (Tyr980) (C14A11) Rabbit mAb受阻光稳定剂 HS-944

甘氨脱氧胆酸钠(进分)Phospho-Cortactin (Tyr421) Antibody过硫酸

牛磺鹅去氧胆酸钠TNK1 (C44F9) Rabbit mAb甲基二硅烷

甘氨脱氧胆酸(GDCA)Mcl-1 Antibody甲基膦酸二甲酯

衣霉素 Phospho-PSD95 (Ser295) (A8F8Z) Rabbit mAb甲基溴化镁

吲哚-甲酸甲酯 Cool2/αPix (C23D2) Rabbit mAb甲氧苄啶

甲溴东莨菪(标准品)FGF Receptor 3 (C51F2) Rabbit mAb氟基酸

脱氧胆酸钠；去氧胆酸钠Lyn (5G2) Mouse mAb十水合硫酸钠

牛磺熊去氧胆酸Phospho-FLT3 (Tyr842) (10A8) Rabbit mAb2-甲

牛磺熊去氧胆酸钠BACH1/BRIP1 Antibody化钴

7-基氨酰基庚酸Phospho-Mcl-1 (Ser159/Thr163) Antibody

新生霉素钠盐Phospho-Bim (Ser69) Antibody无水化铜

磺甲基嘧啶(标准品)CRYAB (D6S9E) Rabbit mAb咪唑并[1,2-b]哒

井冈霉素SDH5 (D1S8D) Rabbit mAb频哪酮

植物蔗糖酸合成酶(SPS)ELISA试剂盒ADO/FITC  荧光素标记2-氨基硫醇双加氧酶IgG20 ul

植物玉米素核苷(ZR)ELISA试剂盒ADORA3/A3AR /FITC  荧光素标记腺苷受体A3IgG100 ul

植物吲哚酸(IAA)ELISA试剂盒ADRA2/FITC  荧光素标记alpha-2肾上腺素能受体IgG100 ul

植物维生素K1(VK1)ELISA试剂盒ADRB1/FITC  荧光素标记肾上腺素能受体β1IgG100 ul

植物维生素E(VE)ELISA试剂盒ADRB2/FITC  荧光素标记肾上腺素能受体β2IgG100 ul

植物维生素D3(VD3)ELISA试剂盒ADRB2(phospho Ser346)/FITC  荧光素标记酸化肾上腺素能受体β2IgG20 ul

植物维生素D2(VD2)ELISA试剂盒ADRB2/RBITC  罗丹明标记肾上腺素能受体β2IgG100 ul

植物维生素D(VD)ELISA试剂盒ADRB3/ Beta3-AR /RBITC  罗丹明标记肾上腺素能受体β3IgG500 ul

植物维生素C(VC)ELISA试剂盒ADRB3/ Beta3-AR /FITC  荧光素标记肾上腺素能受体β3IgG100 ul
牛巴氏杆菌(PB)核酸试剂盒规格小鼠钙通道阻滞剂(CCB)ELISA试剂盒 英文名称：Mouse calcium channel blockers,CCB ELISA Kit *

小鼠肝脂酶(HL)ELISA试剂盒 英文名称：Mouse hepatic lipase,HL ELISA Kit进口/分装

小鼠干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA试剂盒英文名称：Mouse interferon-inducible protein 10,IP-10 ELISA Kit*

小鼠干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)ELISA试剂盒英文名称：Mouse Stem cell factor/mast cell growth factor,SCF/MGF ELISA Kit *

小鼠高灵敏度促甲状腺激素(U-TSH)ELISA试剂盒英文名称：Mouse ultrasensitive thyroid-stimulating hormone,U-TSH ELISA Kit*

小鼠高敏甲状腺素(u-T4)ELISA试剂盒英文名称：Mouse Ultrasensitivity Thyroxine,u-T4 ELISA Kit*小鼠抗抗体(AOAb)ELISA试剂盒   48T/96T   试剂盒   组装/原装

小鼠抗利尿激素/血管加压素/精酸加压素(ADH/VP/AVP)ELISA试剂盒      组装/原装

小鼠抗盐抵抗的酸性磷酸酶(AP)ELISA试剂盒      组装/原装

小鼠抗酸性磷酸酶5b(ACP-5b)ELISA试剂盒      组装/原装         
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。