猪乙型脑炎ELISA诊断试剂盒使用说明书

 猪乙型脑炎ELISA诊断试剂盒使用说明书

【用途】

猪乙型脑炎ELISA诊断试剂盒用于检测猪血清中乙型脑炎病毒抗体。评估猪场乙型脑炎疫苗免疫状况。猪乙型脑炎的流行病学调查。

【简介】

试剂盒由抗原包被的微孔板，酶标羊抗猪IgG及其它试剂制成，应用间接ELISA原理检测猪血清中抗乙型脑炎病毒的抗体。

【原理】

本试剂盒是采用乙脑病毒（JEV）弱毒疫苗毒株经纯化、浓缩制成的抗原包被微孔板，在试验中，加入稀释的对照血清和待检血清，经温育后，若样品中含有乙型脑炎病毒特异性抗体，则将与微孔板上抗原结合，经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后；再加入酶标二抗，与微孔板上抗原抗体复合物发生特异性结合；再经洗涤除去未结合的酶结合物，在孔中加TMB底物液，与酶反应形成蓝色产物，加入HF溶液中止反应后，用酶标仪630nm波长测定各反应孔中的OD值。

【试剂盒主要成分】

1．  包被抗原的微孔板                     2块                    （96孔）

2．  阴（绿盖）、阳（红盖）性对照血清    各1管                   （1ml/管）

3．  抗猪IgG-HRP结合物（黄盖）           1瓶                   （22ml/瓶）

4．  20倍浓缩洗涤液 （白盖）              1瓶                   （30ml/瓶）

5．  底物A（紫盖）液、B（黄盖）液      各1瓶                   （12ml/瓶）

6．  终止液（蓝盖）                        1瓶                   （12ml/瓶）

7．  样品稀释液 （透明盖）                 1瓶                   （50ml/瓶）

【用前准备】

仔细阅读说明书，所有试剂在4℃条件下保存，禁止结冰，如果干燥袋发红不能使用，不用的孔必须用封口膜封住以防潮湿对平板有害，不要使平板接触强光和氧化物。不要使用过期的成分和混合使用成分。注意加样和冲洗，以确保试验的度和准确度。操作过程中注意安全，要使用手套，终止液含有氢氟酸使用要小心。所有的废液要经过处理和净化。

本品为兽用产品。

【未提供的需用材料】

微量加样器、加液槽、蒸馏水、恒温箱、酶标仪、吸水纸

【注意事项】

1、  试剂盒使用前各试剂应平衡至室温。

2、  不同批号试剂盒的试剂组分不得混用。

3、  注意防止试剂盒各组分受污染。

4、  微孔板拆封后避免受潮或沾水（每次将剩余的微孔板用封口袋扎紧后尽快置于4℃）。

【试剂配制】

洗涤液：用蒸馏水稀释20倍浓缩洗涤液，混匀。

【操作步骤】

1、  取预包被的微孔板（根据样品多少，可拆开分次使用）。用样品稀释液将待检样品40倍稀释后加入板孔中，每孔加100μl。阴、阳性对照各设2孔，每孔100μl。另设一空白对照孔，空白对照孔加100μl稀释液。轻轻振匀孔中样品（勿溢出），置37℃温育30min。

2、  甩掉板孔中的溶液，用洗涤液洗板3次，300μl/孔，每次静置3分钟倒掉，zui后一次在不掉屑干净吸水纸上拍干。

3、  每孔加酶标二抗（抗猪IgG-HRP结合物）100μl，置37℃温育30min。

4、  洗涤3次, 方法同2。

5、  每孔加底物A液、B液各1滴（50μl），混匀，室温（20-25℃）避光显色10min。

6、  每孔加终止液1滴（50μl），10分钟内测定结果。

【结果判定】

以空白孔调零，在酶标仪上测各孔OD630值。试验成立的条件是阳性对照孔平均OD630值大于或等于0.4，阴性对照孔平均OD630值必须小于0.2。

样品OD630值大于0.4，判为阳性；样品OD630值在0.2到0.4之间，判为可疑；样品OD630值小于0.2，判为阴性。

【规格】 96孔×2块   

【有效期】6个月  

【贮存】 2-8℃避光保存   

【生产日期】见试剂盒外包装

提示：酶标板真空包装袋若有漏气，酶标板仍然正常有效，不影响实验结果，请放心使用