鸡传染性支气管炎病毒IgG抗体Elisa检测试剂盒

鸡传染性支气管炎病毒IgG抗体Elisa检测试剂盒

【产品简介】

传染性支气管炎是由传染性支气管炎病毒引起鸡的一种急性、高度接触传染性呼吸道传染病，本病呈世界性分布，是严重危害养禽业的zui主要疫病之一。该试剂可以检测非免疫鸡只是否感染野毒或评价疫苗免疫后的免疫效果。

【使用意义】

①本产品用于鸡血清抗体的检测，以确定被检鸡是否感染过鸡传染性支气管炎病毒或免疫鸡体内抗体水平。

②评估鸡群感染IBV的风险程度。

③了解雏鸡母源抗体水平，为IBV免疫程序的制定提供参考。

【检测原理】

本品系由包被传染性支气管炎病毒N蛋白抗原的微孔板和酶标记抗鸡IgG及其他试剂组成，应用酶免间接法原理（ELISA）检测鸡血清或血浆中传染性支气管炎病毒IgG抗体。

【试剂盒组成】

【使用方法】

1. 使用前将试剂盒置室温30分钟，恢复至室温。
2. 取所需用量包被微孔板条，设空白、阴性及阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，2～8℃保存。
3. 阴性、阳性对照孔分别加阴性、阳性对照血清100μl；空白对照孔不加；样品稀释，血清每孔样本先1：50稀释后加100μl；蛋黄以1:100稀释后每孔加100ul。
4. 混匀，置37℃温浴30分钟。
5. 扣去孔内液体，每孔加满洗涤液，静置60秒后弃去，重复洗涤5次，拍干。
6. 每孔加酶标记物100μl（空白孔除外）。
7. 置37℃温浴30分钟。
8. 洗涤，同步骤5。
9. 每孔依次加显色剂A、显色剂B各50μl，混匀，37℃避光反应10分钟。

10. 每孔加终止液50μl，混匀，置酶标仪450nm处测各孔A值（建议用双波长450nm、630nm）。

【结果判定】

1. 阴性对照：正常情况下，阴性对照孔A值≤0.1；
2. 阳性对照：正常情况下，阳性对照孔A值≥0.4；
3. 结果判定：

3.1 未曾免疫

临界值（C.O.）的计算：临界值=0.15+阴性对照孔均值；检测标本A₄₅₀值≥临界值判定为本试验阳性；检测标本A₄₅₀值＜临界值判定为阴性。所有阴性、阳性对照和样品的A值均须减去空白平均值后作为计算值；阴性对照孔A值大于0.10时应舍弃，如所有阴性对照孔A值都大于0.10时须重复实验；阴性对照孔低于0.05时以0.05计算。

3.2 免疫鸡群

免疫鸡群：监测并记录样本当时的抗体水平，根据结果分析抗体水平的分布及鸡群免疫状态的动向

【注意事项】

1. 操作时必须戴手套，穿工作衣，严格健全和执行消毒隔离制度。
2. 试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。
3. 样品稀释液应用加液器加注，并经常校对其准确性。
4. 洗涤时各孔均需加满液体，防止孔口有游离酶不能洗净。
5. 所有样品洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
6. 微孔板从冷藏环境中取出时应在室温中平衡至潮气干尽后方可，未用完的微孔板须放入有干燥剂的密封袋中保存。
7. 用于检测的样品应保持新鲜。
8. 剩余样品及废弃物应经121℃高压蒸汽灭菌30分钟，或用5.0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。
9. 不同批号试剂组分不得混用。

【保存与有效期】

于2～8℃避光保存，有效期自成品检定合格之日起为12个月。