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鸡法氏囊病毒抗体检测试剂盒

时间:2013-8-8阅读:136
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鸡法氏囊病毒抗体检测试剂盒

(版本号:2011-1)

【名    称】

通用名: IBDV IgG抗体检测ELISA试剂盒

【原    理】

本品系由包被IBDV 重组抗原的微孔板和酶标记抗鸡IgG及其他试剂组成,应用酶免法原理(ELISA)检测鸡血清或卵黄中IBDV IgG抗体。

【使用意义】

鸡法氏囊病是由传染汉钷囊病毒引起的一种生接触性传染病。鸡传染性法氏囊炎是青年鸡的一种急性、接触性传染病。临本病的危害主要是病毒侵害鸡的体游人免疫中枢--法氏囊,使鸡的法氏囊的淋巴细胞产生受到破坏,降低或不能产生免疫球蛋白,导致免疫机能障碍。在预防免疫工作中,zui值得关注的就是强化免疫的接种时机问题。该试剂盒检测反映抗体水平,利于指导免疫时机。

【试剂盒组成】

  1. IBDV抗原包被微孔板条       96T×1
  2. 酶标记物                    11ml×1
  3. 样品稀释液                  20ml×1
  4. 显色剂A/B                7 ml每瓶
  5. 洗涤液(用前1:25稀释)    20 ml×1
  6. IBDV抗体阳性对照血清      0.7 ml×1
  7. IBDV抗体阴性对照血清      0.7 ml×1
  8. 终止液                       7 ml×1

【规格】

96头份/盒

【使用方法】

  1. 使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。
  2. 取所需用量包被微孔板条,设空白、阴性及阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。
  3. 阴性、阳性对照孔分别加阴性、阳性对照血清100μl;样品孔样本1:100稀释后加100μl;空白对照孔不加。
  4. 混匀,置37℃温浴30分钟。
  5. 扣去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置60秒后弃去,重复洗涤5次,拍干。
  6. 每孔加酶标记物100μl(空白孔除外)。
  7. 置37℃温浴30分钟。
  8. 洗涤,同步骤5。
  9. 每孔依次加显色剂A、显色剂B各50μl,混匀,37℃避光反应10分钟。
  10. 每孔加终止液50μl,混匀,置酶标仪450nm处测各孔A值(建议用双波长450nm、630nm)。

【结果判定】

阴性对照:正常情况下,阴性对照孔A值≤0.1;

阳性对照:正常情况下,阳性对照孔A值≥0.4;

临界值(C.O.)的计算:临界值=0.15+阴性对照孔均值;所有阴性、阳性对照和样品的A值均须减去空白平均值后作为计算值;阴性对照孔A值大于0.10时应舍弃,如所有阴性对照孔A值都大于0.10时须重复实验;阴性对照孔低于0.05时以0.05计算。(该cut-dff值依据琼扩实验计算得出的)

结果判定:检测标本A450值≥临界值判定为本试验阳性;检测标本A450值<临界值判定为阴性。

【注意事项】

操作时必须戴手套,穿工作衣,严格健全和执行消毒隔离制度。

试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。

样品稀释液应用加液器加注,并经常校对其准确性。

洗涤时各孔均需加满液体,防止孔口有游离酶不能洗净。

所有样品洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

微孔板从冷藏环境中取出时应在室温中平衡至潮气干尽后方可,未用完的微孔板须放入有干燥剂的密封袋中保存。

用于检测的样品应保持新鲜。

剩余样品及废弃物应经121℃高压蒸汽灭菌30分钟,或用5.0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。

不同批号试剂组分不得混用。

【保存与有效期】

于2~8℃避光保存,有效期自成品检定合格之日起为12个月。

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