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上海恩计精密仪器有限公司
阅读:70发布时间:2022-11-18
微生物实验前端我们用微生物限度检查仪提取样品,后面我们需要把提取样品的滤膜贴到事前准备好的培养基上,菌面朝上,平贴,不得有气泡。相应的液体培养基注入滤杯内,培养基掩盖滤膜表面即可。培养基直接关系到微生物的实验结果是否成功。在培养基当中我们的ph值又是重要的影响因素。微生物对生长对于ph环境要求很高。合适的ph环境下微生物才能正常生长。在实验前我们一般都会对培养基进行灭菌处理,灭菌会对培养基的PH值产生重大的变化。今天我们来分析下引起PH值变化有哪些因素。
1、灭菌的时间和温度
在高压湿热灭菌时,长时间的高温会对培养基产生很多不利的影响,例如会导致营养物质分解、营养成分改变以及pH值变化,进而影响微生物生长。同时还可能引起培养基颜色变化、透明度降低、琼脂凝胶强度变化等。培养基在灭菌过程中,灭菌的温度和时间,高压灭菌器升温、降温的速率,灭菌容器的容积和装载方式等因素都对培养基的灭菌有着重要影响。
2、培养基的成分
在培养基的配制过程中我们会发现,同样的灭菌温度和时间,同样的体积和装量的不同培养基,在灭菌后pH值变化不同,有的培养基pH值变化较多,有的培养基pH值变化较少。这是因为不同培养基的成分不尽相同,而不同的成分在灭菌过程中对培养基ph值有着不同的影响。糖类和蛋白胨是培养基中见的两种重要成分,那么这两种成分分别对培养基灭菌后pH值有着什么样的影响呢?
糖类,例如葡萄糖、乳糖等作为碳源被微生物所利用。糖类在高温条件下会产生有机酸使培养基pH值下降。一般情况下,培养基含糖量越高,灭菌后pH值下降越多。如果过度灭菌pH值变化会更加明显。同时,糖类在高温灭菌时容易焦化,使培养基颜色加深。
蛋白胨一般作为培养基氮源,为微生物的生长提供营养物质。蛋白胨在培养基灭菌时还能对培养基的pH值变化起到一定的缓冲作用。一般含胨量高的培养基,灭菌前后pH值变化相对较小。
另外,若培养基成分中含有缓冲剂,如等,也可以减少培养基灭菌前后pH值的变化。
3、测量pH值时的温度
同一培养基在不同温度下测得的pH值也会有一定差异,一般培养基的pH值会随着测量时温度的升高而降低。培养基灭菌之后未冷却时,测量的pH值一般会偏低,这是由于温度升高时溶液中的游离离子数增多,测得的pH值较低;反之,当温度降低时游离离子数减少,测得的pH值较高。通常我们在测定培养基pH值时,温度控制在25℃左右。
以上就是微生物中培养基PH值引起变化的重要原因,知道这些因素我们在合理的操作控制PH值能更好的的到微生物实验想要的结果!
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