产品名称：HeLa细胞专用培养基

产品货号：TCH-G193

培养体系：MEM+10%FBS+1%P/S

产品规格：500mL / 200mL / 125mL

产品形态：液体

生物安全检测：细菌、真菌、支原体检测阴性

内毒素含量：＜10 EU/mL

储存条件：2-8℃，避光储存

运输条件：冰袋冷藏运输

有效期：3 months

HeLa细胞培养基TCH-G193 由Cas9X海星生物技术团队精心优化，可保持HeLa细胞理想的生长状态。本产品已包含HeLa细胞生长的各种成分，无需额外添加，可直接用于HeLa细胞的体外培养。

注意事项

(1) 本产品含有血清和双抗，如无特别需要不用额外再添加血清和双抗，可以直接使用。

(2) 使用前请将产品提前置于室温或37°C充分预热。

(3) 使用产品时应注意无菌操作，避免污染。

(4) 使用产品时请做好个人防护。

(5) 为保持本产品的使用效果，不宜将其长时间放置于室温或较高的温度环境中。

(6) 所有产品请于保质期内使用，超出保质期，请放弃使用。

HeLa细胞复苏及传代培养简要实验步骤如下：

细胞培养试剂：DMEM培养基，胎牛血清，，，0.25%（含0.02%的EDTA），PBS等。

细胞培养耗材：T25细胞培养瓶、移液枪吸头、50ml离心管、15ml离心管、细胞计数板。

实验室仪器设备:二氧化碳振荡培养箱、 光学显微镜、瑞宁移液器、 超净台、 恒温水浴锅、酒精灯，-80冰箱，液氮罐，低温冷冻存储箱。

HeLa细胞复苏步骤：

冻存液： 含10%血清的培养基和5％-10% DMSO

取对数生长期细胞， 精消化后加入适量冻存液，用吸管吹打制成 细胞悬液（1×106 ~5×106细胞/ml），加入1ml细胞于冻存管中，密封后标记细胞名称和冷冻日期。

复苏细胞是从零下80℃冰箱或液氮罐中取出冻存管，迅速投入37℃水浴中，使其融化（1分钟左右），用培养集缓慢稀释至原体积的10倍以上，大部分细胞贴壁后（4~6小时），吸取含有冻存液的培养基，并换成培养基。

HeLa细胞复苏实验步骤：

1. 从零下80℃冰箱或者液氮罐中取出冷冻管，迅速投入37℃水浴中，使其融化（1分钟左右）。

2．培养基缓慢稀释至原体积的10倍以上。

3.低速离心10分钟，吸去上清，加入新鲜的培养基培养刚复苏的细胞。

HeLa细胞传代实验步骤：

取密度80％左右的Hela细胞，吸去旧的培养基，用PBS或者Trypsin消化液润洗细胞以减少残留的血清对Trypsin的抑制作用。

吸去PBS或者Trypsin，加入Trypsin消化液，于37℃消化2～4分钟，于倒置显微镜下观察，当细胞之间出现间时或者变圆时，吸掉Trypsin消化液。   加入适量HeLa细胞培养基 ，用移液器上下吹打数次打散细胞团块以尽可能形成单细胞悬液，吹打均匀后，按照稀释比例转移至新的培养瓶中，补充培养基并以正常培养条件培养。