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免疫学技术在检验和检疫中应用的原理
最近更新时间:2012-6-14
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借助抗原和抗体在体外特异结合后出现的各种现象,可以对样品中的抗原或抗体进行定性、定量、定位的检测。
抗原抗体的结合反应并不是化学反应,而是非共价的可逆结合。抗原决定簇和抗体分子可变区所形成的互补构型,造成两种分子间具有较强的亲和力。空间构型互补程度不同,抗原分子和抗体分子之间结合力强弱也不同。互补程度高,则亲和力强。此外,反应温度、酸碱度和离子浓度对抗原和抗体分子上各基因的解离性和电荷特性也有重要的影响,抗体与抗原决定簇之间的结合力大小可用亲和力来表示。高亲和力的抗体与抗原的结合力强,即使抗原浓度很低时也有较多的抗体结合抗原形成免疫复合物。
根据抗原—抗体结合形成免疫复合物的性状与活性特点,可以对标本中的抗原或抗体进行定性、定位或定量的检测。定性和定位检测比较简单,即用已知的抗体和待检样品混合,经过一段时间,若有免疫复合物形成的现象发生,就说明待检样品中有相应的抗原存在。若无预期的现象发生,则说明样品中无相应的抗原存在。同理也可用已知的抗原检测样品中是否有相应抗体。对抗原或抗体进行定量检测时,反应中加入抗原和抗体的浓度与形成免疫复物的浓度呈函数关系。
可根据免疫复合物产生的多少来推算样品中抗原(或抗体)的含量。在一定的反应条件下,加入一定浓度的已知抗体(或抗原),反应产生的免疫复合物多少与待检样品中含有相应抗原(或抗体)量成正比。可用标准曲线推算出样品中抗原(或抗体)的含量。如免疫单向扩散试验、免疫比浊试验和酶联免疫检测等都属于这类方法。