YIJI石蜡载玻片特恩布尔（TURNBULL-DAB）非血红素铁（二价）强化染色试剂盒

产品说明书（中文版）

主要用途

YIJI石蜡载玻片特恩布尔（TURNBULL-DAB）非血红素铁（二价）强化染色试剂是一种旨在使用标准化的化学分离石蜡方法和氰正铁酸盐结合反应技术，进一步使用二氨基联苯胺的强化扩增，分析存档中的石蜡包埋的组织切片中二价亚铁离子（ferrous ion）沉积现象的而经典的技术方法。该技术经过精心改良TURNBULL方法、成功实验证明的。主要适用于各种石蜡包埋组织切片样品中的二价亚铁离子检测。广泛用于各种神经细胞或组织病理生li的研究。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，显色清晰。

技术背景

二价铁（ferrous）是氧化数为二的铁。二价铁溶解性好，生物学效价优于三价铁，因此铁首先应被还原为二价铁，才容易被生物体吸收利用。动物和人体的整个消化道都可以吸收，植物在根尖处吸收。机体大约有三分之二的铁存在于红细胞的血红蛋白和肌肉的肌红蛋白中，20％的铁以不同形式存在于肝、脾和其他组织中。铁作为氧的载体，保证组织内氧的正常输送，在细胞生物氧化和能量代谢过程中发挥着重要作用。由于中枢神经组织细胞等含有非血红素性铁的轻度沉积，使用常规的染色方法敏感性不足，采用二氨基联苯胺（3,3’-diaminobenzidine，DAB）的强化扩增效应，分二价铁沉积现象。通过酸性氰正铁酸盐（ferricyanide）与组织细胞中二价正铁离子（ferrous ion）结合，成为铁氰亚铁（ferrous ferricyanide），进而催化二氨基联苯胺的氧化，电子供体DAB失去电子，而呈现出颜色变化和沉积，形成棕褐色不溶性产物。其反应原理如下：

产品内容

YIJI脱蜡液（Reagent A）        毫升

YIJI补水液A（Reagent B） 毫升

YIJI补水液B（Reagent C） 毫升

YIJI补水液C（Reagent D） 毫升

YIJI清理液（Reagent E） 毫升

YIJI染色液（Reagent F） 毫升

YIJI酸性液（Reagent G） 毫升

YIJI封阻液（Reagent H） 毫升

YIJI显色液（Reagent I） 毫升

YIJI反应液（Reagent J） 毫升

产品说明书 1份

保存方式

保存YIJI显色液（Reagent I）在-20℃冰箱里；其余的保存在4℃冰箱里；YIJI染色液（Reagent F）和YIJI显色液（Reagent I），避免光照；YIJI染色液（Reagent F）和YIJI酸性液（Reagent G）具有腐蚀性和毒性，注意操作安全；有效保证6月

用户自备

2毫升离心管：用于染色工作液配制的容器

小型染色缸：用于组织细胞染色操作

光学显微镜：用于组织细胞染色后观察分析

实验步骤

• 脱蜡处理

• 取出10片待测的石蜡包埋的5微米厚的组织切片（注意：石蜡包埋前，组织切片须用10％甲醛4℃条件下，固定16小时，此步很重要）
• 放进80℃烘箱，孵育30分钟
• 室温下静置15分钟
• 按下表依次放进小染色缸里孵育

• 小心移去切片上的YIJI清理液（Reagent E）

二、样本染色处理

操作开始前，将4℃冰箱里的试剂盒中的YIJI染色液（Reagent F）和YIJI酸性液（Reagent G）置入室温下，分别移出1毫升到2.2毫升离心管，混匀后，标记为YIJI染色工作液，用锡箔纸包裹，避免光照。然后进行下列操作。

• 小心加上xx微升YIJI染色工作液，铺满整个切片样品表面
• 室温下孵育60分钟；或直至可见篮色
• 小心移去切片上的YIJI染色工作液
• 室温下，小心将切片置入xx毫升YIJI清理液（Reagent E）中孵育2分钟
• 小心移去切片上的YIJI清理液（Reagent E）  

三、 样本显色处理

实验开始前，将－20℃冰箱里试剂盒中的YIJI显色液（Reagent I）置入冰槽里融化，然后移取xx微升YIJI显色液（Reagent I）和xx毫升YIJI反应液（Reagent J）到2.2毫升离心管，充分混匀，标记为YIJI显色工作液，置于暗室。YIJI显色液（Reagent I）用完即刻放回－20℃冰箱里。

• 小心加上xx微升YIJI封阻液（Reagent H）在切片上，铺满整个切片样品表面
• 室温下孵育20分钟
• 小心移去切片上的YIJI封阻液（Reagent H）
• 室温下，小心将切片置入xx毫升YIJI清理液（Reagent E）中孵育2分钟
• 小心移去切片上的YIJI清理液（Reagent E）（注意：须清洗干净，否则影响下一步操作）
• 小心加上xx微升YIJI显色液（Reagent I）在切片上，铺满整个切片样品表面
• 室温下孵育20分钟，避免光照
• 小心移去切片上的YIJI显色液（Reagent I）
• 小心加上xx微升YIJI显色工作液在切片上，铺满整个切片样品表面
• 室温下孵育15分钟，或直至肉眼可见棕黑色沉积，避免光照
• 小心移去切片上的YIJI显色工作液 
• 室温下，小心将切片置入xx毫升YIJI清理液（Reagent E）中孵育2分钟
• 小心移去切片上的YIJI清理液（Reagent E）
• 放上盖玻片或封片
• 即刻在一般光学显微镜下观察：二价铁沉积阳性细胞呈现棕褐色

注意事项

• 本产品为50次操作
• 操作时，须戴手套和防护面罩
• 建议在通风柜里操作
• 所有操作在室温下进行
• YIJI染色液（Reagent F）和YIJI酸性液（Reagent G）具有腐蚀性和毒性，注意操作安全
• 每次更换试剂溶液时，保持切片面基本晾干。空气中晾干状态为没有水滴，呈湿润状态，可见反光
• 试剂溶液在切片表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满切片表面
• YIJI显色液（Reagent I）避免反复冻融
• YIJI显色工作液不能储存后使用；如果发现沉淀，不宜使用
• 样品染色避免过度，肉眼可见棕色即可终止染色
• 组织细胞染色完成后，即刻进行光学显微镜观察 
• 本公司提供系列组织细胞金属元素染色试剂产品

质量标准

• 本产品经鉴定性能稳定
• 本产品经鉴定显色清晰

订购信息

单组份订购信息

编号 名称 规格

YJ80082.4 YIJI石蜡载玻片特恩布尔非血红素铁（二价）强化染色试剂盒 50次

YJ80082.4A YIJI脱蜡液（Reagent A） 毫升

YJ80082.4B YIJI补水液A（Reagent B） 毫升

YJ80082.4C YIJI补水液B（Reagent C） 毫升

YJ80082.4D YIJI补水液C（Reagent D） 毫升

YJ80082.4E  YIJI清理液（Reagent E） 毫升

YJ80082.4F  YIJI染色液（Reagent F） 毫升

YJ80082.4G YIJI酸性液（Reagent G） 毫升

YJ80082.4H  YIJI封阻液（Reagent H） 毫升

YJ80082.4I  YIJI显色液（Reagent I） 毫升

YJ80082.4J  YIJI反应液（Reagent J） 毫升 

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