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自然基因科技有限公司
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随着分子生物学技术的不断发展，原位杂交在分子病理和科学研究方面得到了日益广泛的推广和应用。在原位杂交和FISH实验中，变性温度是至关重要的环节，也是确保原位杂交实验成功的关键步骤。NatureGene ThermoBrite原位杂交仪可以根据实验者的设置，自动完成变性和杂交过程。严格的温度控制，适宜的湿度环境，加上低廉的成本，和时间上的节省，为分子水平的研究提供了可靠的保证。
原位杂交仪的***
ThermoBrite 原位杂交仪是自然基因科技总代理产品，常年现货供应。
ThermoBrite 原位杂交仪特点：
· 一次可进行12张切片的实验
· 反应舱密封禁闭，温度适宜
· **的温控，温室均匀一致
· 三种固定运行模式
· 四十种自定义编辑程序
· 数字键盘操作，方便易行
ThermoBrite是原位杂交领域的**者，其上等的性能在广大用户中获得了。
严格温度控制
· 温差在设定温度±1℃
· 的温度均一性
· 不受切片数量影响
· 理想的温度控制
简单程序设置
· 40种使用者自定义的程序
· 3种已设置运行模式
· 显示屏随时显示实验条件，实验过程一目了然
操作简单方便
· 玻片取放容易，开盖即可操作
· 全部实验自动化
· 数字键盘，使用方便。
系统指标：
StatSpin ThermoBrite®系统---ThermoBrite 原位杂交仪
* 由于集成了（F）ISH处理步骤，减少了大量手工操作时间
* 避免有害试剂的伤害
* 无需将12张玻片全部放入，也可保持温度均一性
* 玻片卡槽在位设计使得单手操作成为可能
* 节省试剂、节省人工、节省资金
* 薄膜式面板容易清洁
* 小体积设计
* 支持各种不同类型的样本。
订货信息：
| TS01 | ThermoBrite Unit, 120 VAC 50-60 Hz |
| TS02 | ThermoBrite Unit, 240 VAC 50-60 Hz |
| HC10 | Humidity ControCards (10pk) |
ThermoBrite原位杂交仪是世界***稳定的该类仪器。
1. Barese Cecilia, Pech Nancy, Dircheri Sara, Meyers Justin, Sinn Anthony L., Yoder Mervin C., GoebeScott, Dinauer Mary C. "Granulocyte Colony-Stimulating Factor Prior to Nonmyeloablative Irradiation Decreases Murine Host Hematopoietic Stem CelFunction and Increases Engraftment of Donor Marrow Cells" The Stem CelNiche, March 2007; doi: 10. 1634/stemcell. 2006-0808
2. Kim Sungjin, Song Yun-Jeong, Higuchi DarryA., Kang Hyunseok P., Pratt Jennifer R., Yang Liping, Hong Caron M., Poursine-Laurent Jennifer, Iizuka Koho, French Anthony R., Sunwoo John B., Ishii Shunsuke, Reimold Andreas M., and Yokoyama Wayne M. "Arrested NaturaKiller CelDevelopment Associated with Transgene Insertion into the Atf2 Locus" Blood, Feb 2006; 107: 1024-1030
附录：关于HER2(转)
HER2是一种位于乳腺和乳腺癌细胞表面的受体，能够控制癌细胞的生长、浸润和癌细胞的转移，大约20%的乳腺癌病例中HER2基因和/或蛋白水平增加，这些HER2阳性的肿瘤是一种高危肿瘤，对某些常规的和****反应性差，通常预后不好。为此，多种阻断HER2的****相继问世，其中目前*为常用并经FDA批准的此类**是（赫赛汀），适用于**HER2过度表达的乳腺癌。由于这种**只有针对HER2基因扩增和蛋白过度表达的病人才有效，因此准确评价HER2基因和蛋白水平是至关重要的。
FDA已经批准的检测方式为**组化（IHC）和荧光原位杂交方法（FISH），显色原位杂交方法（CISH）也已申报FDA等待批准。由于CISH与FISH方法相比具有符合率高、成本低、标本可长期保存等特点，目前被国内外许多检测机构采用。作为筛查病人是否使用赫赛汀的手段，上述方法经过国内外临床的实践检验证明是可行的。但是，还有近1/4的病人由于检测结果不准确而接受了不当的**。美国有一项调查显示，IHC检测HER2蛋白过表达的错误阳性率平均为18%，FISH检测HER2基因扩增的错误率在13%，造成这种情况的原因是多方面的，尽管很多实验室也在使用FDA批准的检测试剂盒，但是近半数的实验室所使用的方法都会或多或少与FDA批准的步骤有所不同，比较集中的表现在两个环节：（1）许多实验室未使用中性福尔马林固定，市场上商品化的各种固定剂名目繁多，由于砖利等方面的原因，我们实际并不知道真实成分（2）新型自动化设备对组织进行快速处理，其所使用的砖利固定剂和快速的组织处理时间都和以往有所不同，所以参照FDA认可的方法对现有方法进行比对就变得十分必要。考虑到**需要昂贵的费用和**本身所具有的毒副作用（主要是心脏），美国临床肿瘤协会（ASCO）和美国病理家协会（CAP）近期联合制定了乳腺癌HER2临床检测指南，并发表在2007年1月的协会期刊上，对HER2检测所涉及的有关问题重新进行了定义和规范，其中某些内容已被FDA接受并即将实施。
专家组成员一致强调的HER2执行标准部分如下：
1.检测仅应该针对浸润性乳腺癌或乳腺癌的浸润性部分
2.组织处理的条件必须标准化，固定液为10%中性缓冲福尔马林，固定时间是6-48小时，并且上述条件需在病理报告中标注
3.在下列情况下，对HER2**组化和荧光原位杂交结果难以作出正确的评判：
v HER2**组化判定排除标准
（1）组织固定没有使用中性缓冲福尔马林
（2）针吸标本在中性缓冲福尔马林固定液中固定少于1小时
（3）手术切除标本在中性缓冲福尔马林固定液中固定少于6小时或超过48小时
（4）具有边缘收缩或挤压人工假象的穿刺标本
（5）在内部正常导管或小叶具有很强的膜染色的组织
（6）对照组呈现非预想结果时
v HER2荧光原位杂交排除标准
（1）浸润性乳腺癌细胞数量少难以在UV光下界定的样品
（2）没有使用中性缓冲福尔马林固定组织
（3）组织固定时间过长（超过48小时）
（4）对照组呈现非预想结果
（5）FISH信号不均一（一致性<75%）
（6）出现背景弥散信号（>10%信号位于细胞浆）
（7）不合适的酶消化（核分辨不清、持续性自发荧光）
4.所采用的试验步骤必须经过试验证实可靠，新试验结果需和经认证的可靠的试验结果符合率在95%以上
5.检测步骤必须标准化，任何改动必须和原标准化步骤进行校正，专家组认为自动化染色平台要优于人工操作，后者需要定期进行自检
6.每次试验需设置标准对照，对照可以是细胞系或已知蛋白和基因表达情况的肿瘤组织，如果对照没有出现预期结果，则不能对结果做出判定
7.应用计算机图像分析有益于结果的判定，但图像分析系统需经过标准化确认，结果仍需病理学家确认
8.HER2各种检测结果的评判标准必须标准化，依据*新的临床结果和各国所积累的经验，评判标准还需要重新定义
v HER2**组化判定标准
（1）检查对照标本，如果不是预期结果，试验需重复
（2）阳性结果需超过30%的肿瘤细胞呈现完整的细胞膜染色方可判定
（3）必须可见均一的强细胞膜完整染色
（4）忽略不完整或浅的细胞膜染色
（5）对于弱的细胞膜染色病例（1-2+）推荐使用定量图像分析
（6）如果细胞浆染色遮盖了细胞膜染色，需重复试验或进行FISH
（7）如果正常导管或小叶呈现确定的染色，应弃去标本
（8）如果存在模糊的人工假象，应弃去标本
（9）避免判定导管内癌（DCIS），仅能对浸润性导管癌进行打分
v HER2荧光原位杂交判定标准
（1）复习相应的HE和**组化片，以确定浸润性癌细胞所在的位置，原位癌不应加以评判
（2）检查对照标本，如果不是预期结果，试验需重复
（3）在两个独立的浸润癌部分至少检测20个非重叠的细胞
（4）如果信号是非均一的（>25%），应弃去标本
（5）如果自发荧光很强或细胞核分辨差，应弃去标本
（6）如果背景染色影响信号的评判（>10%位于细胞浆）
（7）如果HER2/CEP17比值在1.8~2.2之间，需其他人重复计算
（8）如果是非均一性表达，需其他人重新计算
（9）可由经过培训的技术人员计算结果，但是需经病理医生确认结果是否准确，采样是否位于浸润性肿瘤细胞
9.HER2检测报告必须标准化
另外，专家组还对于开展上述检测的实验室标本检测数量进行了规定，如果每年检测数量很低，那么就不能保证结果的可靠性。
这份新的HER2检测指南一经问世，就在美国病理学界引起了巨大的反响。起草指南的专家组主席Hammond认为新指南向病理学家传递了两方面重要的信息：
1.对有关“阳性"、“可疑"和“阴性"结果的定义进行了重新修订，牵涉到IHC和FISH两种方法，同时对两种方法的判定排除标准进行了详尽的说明。每一种试验都包括三种结果，即阳性、可疑和阴性。“阳性"定义为3+表达（IHC）和HER2基因/CEP17的比值大于2.2（FISH）“可疑"定义为2+表达（IHC）和HER2基因/CEP17的比值是1.8-2.2（FISH）“阴性"定义为0或1+表达（IHC）和HER2基因/CEP17的比值小于1.8-2.2（FISH），如果没有17号染色体作为内对照，上述三种情况所对应的HER2基因拷贝数分别为>6、4~6和<4。对于可疑的IHC结果，必须进行基因扩增的检测对于可疑的FISH结果，可以重新计算切片中其它部位的细胞扩增数或重新检测IHC。对于三种情况的定义，修改*大的是IHC3+需要大于30%的肿瘤细胞呈现强的、完整的细胞膜着色，而不是先前FDA定义的大于10%的肿瘤细胞（FDA已经接受了这种修改）。
2.强调HER2检测质量保证体系的必要性并提出相应的具体措施。新指南指出现存的HER2检测质量认证体系存在许多问题，必须予以强化并提出具体的方法，包括强制相应的检测机构参加质量评定工作（目前美国只有25%~30%的实验室参加）、使用已知基因扩增和蛋白表达情况的组织芯片（至少包括200例乳腺癌）、*终符合率要达到90%以上、每年至少检测两次（包括20个IHC和80个FISH标本）等，如果达不到要求，可以停止其检测资格，当然这些措施会逐步实施，FDA已经同意逐步开展这项工作。
PhenoPath Laboratories的**病理学家Allen M.Gown认为新指南迈出了一大步，主要表现在两个方面，一是促使病理学家和肿瘤学家相互合作，尽管这种必要性人人皆知，但是新指南为这种合作提供了一种程式化的模式二是指出HER2检测的*大影响因素在于试验前期的各项工作，其中*为重要的影响因素是固定，病理学家今后也需要关注一下标本的固定方式和固定时间，这不仅仅是为了获得满意的HER2检测结果，同时对其它病理科所检测的各项指标都非常有益，比如*常检测的ER也会因为固定的问题（6小时是所需要的*短的固定时间）而影响到检测结果。
关于我们：
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