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上海研生实业有限公司
阅读:4702发布时间:2012-8-28
如何测定病毒的滴度
测定病毒滴度方法有空斑、TCID50(半数组织培养物感染剂量),具体的要看你是什么病毒、敏感细胞是什么。
空斑检测的是具有感染力的病毒粒子数量,是病毒滴度检测的金标准。空斑形成单位(Plaque-forming unit,PFU)测定是一种测定病毒感染性比较准确的方法,将适当浓度的病毒悬液接种到生长单层细胞的培养板、玻璃平皿或扁瓶中,当病毒吸附于细胞上后,再在其上复盖一层溶化的半固体营养琼脂层,待凝固后,孵育培养。当病毒在细胞内复制增殖后,每一个感染性病毒颗粒在单层细胞中产生一个局限性的感染细胞病灶,病灶逐渐扩大,若用中性红等活性染料着色,在红色的的背景中显出没有着色的“空斑”,清楚可见。由于每个空斑由单个病毒颗粒复制形成,所以病毒悬液的滴度可以用每毫升空斑形成单位(PFU)来表示;
TCID50也可以计算病毒滴度,其滴度值理论上为半个具有感染力的病毒粒子数量的稀释值,理论上即可换算为logTCID50=log plaque+0.67
此外,一些病毒还有其它较为粗放的滴度检测方法,如血凝效价、OD280等。
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