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上海研生实业有限公司
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阅读：203发布时间：2012-09-13
兔白细胞介素-4ELISA 检测试剂盒实验方案
试剂的准备
标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：
800 pg/ml （6号标准品） 原倍浓度不用稀释直接加入50ul。
400 pg/ml （5号标准品） 100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液
200 pg/ml （4号标准品） 100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液
100 pg/ml （3号标准品） 100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液
50 pg/ml （2号标准品） 100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液
25 pg/ml （1号标准品） 100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液
0 pg/ml （空白对照） 原始浓度不用稀释直接加入50ul。
洗涤缓冲液（20×）的稀释：蒸馏水20倍稀释。
操作步骤
使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。
加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的*标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
在450nm波长处测定各孔的OD值。
建议使用的实验方案
标准品浓度（pg/ml）
A 800 800 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
B 400 400 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
C 200 200 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
D 100 100 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
E 50 50 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
F 25 25 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
G 0 0 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
H 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
TC-axbz-226 大鼠垂体瘤细胞 MMQ
TC-axbz-227 小鼠原B细胞株 BaF3
TC-axbz-228 小鼠脑瘤细胞 BC3H1
TC-axbz-229 大鼠小肠隐窝上皮细胞 IEC-6
TC-axbz-230 猪肾细胞 LLC-PK1
TC-axbz-259 绿色荧光蛋白标记小鼠子宫颈癌细胞 U14-GFP
TC-axbz-260 小鼠浆细胞瘤 MPC-11
TC-axbz-261 转PYTL基因小鼠睾丸支持细胞 15P-1
TC-axbz-262 BALB/C小鼠肝上皮细胞 BNL1ME A.7R.1
TC-axbz-263 小鼠结肠癌细胞 CT26.WT [CT26WT]
TC-axbz-264 小鼠网织细胞肉瘤 M5076排卵试条 金标法 尿液 50T/100T
弓形虫抗体（IgG\IgM） 金标法 血清 20T/40T
风疹病毒抗体（IgG\IgM） 金标法 血清 20T/40T
巨细胞病毒抗体（IgG\IgM） 金标法 血清 20T/40T
单纯疱疹病毒Ⅰ抗体（IgG\IgM） 金标法 血清 20T/40T
肺炎支原体抗体（IgG\IgM） 金标法 血清 20T/40T
肺炎衣原体抗体（IgG\IgM） 金标法 血清 20T/40T
结核抗体（IgG\IgM） 金标法 血清 20T/40T
淋球菌抗体（IgG\IgM） 金标法 血清 24T/48T
梅毒抗体（IgG\IgM） 金标法 血清 24T/48T
单纯疱疹病毒Ⅱ抗体（IgG\IgM） 金标法 血清 24T/48T
人类乳头瘤病毒抗体（HPV） 金标法 血清 24T/48T人Ⅰ型胶原N末端肽（NTX）ELISA试剂盒 Human cross linked N-opeptide of type Ⅰ collagen,NTX ELISA试剂盒
人幽门螺旋杆菌IgM（Hp-IgM）ELISA试剂盒 Human Helicobacter pylori IgM,Hp-IgM ELISA试剂盒
人细胞毒素相关蛋白A（CagA）ELISA试剂盒 Human Cytotoxin-associated protein,CagA ELISA试剂盒
人胃抑素（GIP）ELISA试剂盒 Human gastric inhibitory polypeptide,GIP ELISA试剂盒
人补体片段3c（C3c）ELISA试剂盒 Human Complement fragment 3c,C3c ELISA试剂盒
人补体7（C7）ELISA试剂盒 Human Complement fragment 3c,C3c ELISA试剂盒
人补体7（C7）ELISA试剂盒 Human Complement 7,C7 ELISA试剂盒
人β淀粉样蛋白1-42（Aβ1-42）ELISA试剂盒 Human amyloid beta peptide 1-42,Aβ1-42 ELISA试剂盒 96T
人chemerin ELISA试剂盒 Human chemerin ELISA试剂盒
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