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试剂盒分类有哪些

时间:2012-4-19阅读:253
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试剂盒有哪些分类
一般试剂盒不是都分人、小鼠、大鼠的吗,比如说ELISA双抗夹心试剂盒,如果检测人的抗原就要用人的试剂盒,我想问的是,这几种试剂盒本身区别在哪里,是包被的抗体与酶标抗体来源不同吗,也就是说人的试剂盒就要都用人的抗体?在临床上,不能用小鼠的单抗包被酶标制成的试剂盒吗?换句话说,检测人的ELISA试剂盒是怎么做出来的呢?

答:

你可能把抗原抗体弄错了。测人的试剂盒用的抗体是抗人的,比如测人乙肝病毒,可以用小鼠抗人乙肝病毒。这样这个抗体才能与人乙肝病毒抗原反应。
夹心法中,包被的抗体与酶标抗体,如果是单抗,理论是不能用一样的,不过商品化的单抗有可能是混合单抗(识别不同的表位的抗体混在一起)这样就又可以用一样的。而多抗用一样的自然没问题。

一般的人们总以为试剂盒只分为人,小鼠与大鼠,其实不是的,试剂盒分很多种,有人体,动物的,植物,在这里面还要分ELISA试剂盒,比如说ELISA试剂盒里面还要分:细胞的,免疫的,血清的等等。

像常见传染病检测elisa试剂盒有分为:幽门螺杆菌,乙脑,乙肝,丙肝,丁肝,戊肝,庚肝,衣原体,性病,腺病毒,微小病毒B19,天疱疮,水痘-带状疱疹病毒,生殖支原体,伤寒,沙眼,腮腺炎,人型支原体,麻疹,轮状病毒,流行性出血热,淋球菌,莱姆病,柯萨奇,抗解尿支原体,军团菌,结核,胶原,尖锐湿疣,甲肝,脊髓灰质炎,急性胰腺炎尿*,霍乱,呼吸道合胞病毒,肝吸虫,副流感,肺炎,带状疱疹,传染性单核细胞增多症,层粘蛋白,布鲁氏杆菌,百日咳,白喉,艾柯病毒,EB病毒,A族链球菌等等
在使用试剂盒是还要注意:ELISA 试验时,注意事项如下
1. 正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。
2. 在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值zui大而蛋白量zui少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。

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