荧光素标记α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶抗体IgG

常用上皮组织及肿瘤标记物
1.角蛋白（Keratin）
角蛋白分为表皮角蛋白和细胞角蛋白两种，这是根据其分部的部位而分的。表皮角蛋白包括皮肤表皮，消化道粘膜上皮、腺上皮甲状腺滤泡上皮、气管、支气管上皮、肺泡上皮，角膜上皮、前列腺上皮等。细胞角蛋白包括颌下腺，胰腺，胸腺，细胞，肝细胞，肾小管细胞等。目前，应用上述细胞中间丝角蛋白作为抗原所制备的抗体有单克隆抗体和多克隆抗体。角蛋白可有19个亚型 ，分为碱性和酸性，从1-8为碱性，9-19为酸性，分子量40-68不等，复层鳞上皮多为高分子量，单层上皮则多为低分子量，了解这些在临床的鉴别诊断及抗体的应用中都 有极大的帮助。目前，检测这类特质的抗体很多，根据不同的克隆生产出不周类型的抗体。常用的抗体有：
①单克隆小鼠抗人细胞角蛋白（Monoclonal mouse anti human cytokeratin）克隆为MNF116。
该抗体应用范围，各类的冰冻切片，涂片，细胞培养片和经甲醛固定石蜡包埋的组织切片 。用本抗体检测的阳性组织有：鳞状上皮，甲状腺滤泡上皮消化道上皮，胰腺胆管上皮，肝胆管上皮，角膜上皮等以及发生于上述来源的肿瘤。应该注意的是有一些肿瘤在检测时，可出现两种阳性物，即用两种抗体来检测如采用CK和Vimentin，可出现双向表达阳性的肿瘤有：癌内瘤，子宫内膜腺癌肺腺癌，上皮样内瘤，滑膜内瘤，唾液腺肌上皮瘤，间皮瘤等等。这是由于在这些肿瘤中存在着两种不同的中间丝的缘故。
应用该抗体检测呈阴性的肿瘤有：各种淋巴瘤，各类肌源性的肿瘤，恶性黑色素瘤，骨肿瘤，纤维组织肿瘤，脂肪肿瘤，神经组织肿瘤和精原细胞瘤等。
在检测某些肿瘤时，常可出现这样的问题，在同一张切片上，同样的鳞状细胞癌的细胞，有的抗原表达为强阳性，有的表达为中度阳性性，有的表达为弱阳性，甚至有的呈阴性。这主要是由于各种细胞处于增生的不同阶段，细胞分泌的抗原量不同，因而表达 也不同。
该抗体可用各种方法检测，但用真空负压LSAB法。产品说明书注明该抗体稀释度1：50至1：100，我们使用为1：100。
②单克隆小鼠抗人细胞角蛋白，克隆为LP34。该抗体的使用范围，检测各种组织基本上与①号抗体相同，但效果不如①号。
③单克隆小鼠抗 人细胞角蛋白，克隆为35BH11。该抗体的特点是：A，可检测几乎所有的非鳞状上皮包括卵巢腺癌，胃肠道腺癌，甲状腺癌，肝癌， 子宫癌，肾癌等。B、不与鳞状上皮起反应。C、对膀胱癌，鼻咽癌，胸腺癌等部分阳性。但是，该 抗体只能用于冰冻切片 ，涂片和细胞培养片。不能用于石蜡切片 。
④单克隆小鼠抗 人细胞角蛋白，克隆34BE12。该 抗体属于高分子量类型，它可检测鳞状上皮管上皮和 复层上皮的组织及其来源的肿瘤。
适用范围：可用于各种类型的切片 。
2.单克隆小鼠抗人上皮细胞膜抗原 （Monoclonal mose anti human epithelial memberance antigen,EMA）
上皮细胞膜抗原是上皮细胞表面大分子糖蛋白物质，它不仅存在于各种上皮，以及各种上皮来源的肿瘤，也可存在于部分非上皮及其来源的肿瘤，如浆细胞，组织细胞等。
应用EMA来检测正常的组织时，其阳性表达主要在细胞膜上，但在检测肿瘤时，这种阳性物不仅在细胞膜上出现，也可在细胞浆中见到。实验中发现，肿瘤细胞在分化增生时，阳性物表达强阳性。当肿瘤细胞趋于成熟或已成熟时，阳性物表达较弱，肿瘤细胞未分化时，抗原表达呈阴性。
EMA在检测上皮组织及其来源的肿瘤组织时，抗原表达阳性，在检测非上皮来源的肿瘤如浆细胞瘤，滑膜内瘤，上皮样内瘤，平滑肌内瘤，神经鞘瘤，及来恶性神经鞘瘤时，抗原也可表达为部分阳性。因此认为：EMA不是上皮性来源肿瘤所*的标记物，它的特异性不高。
该 抗体适用范围广，适合于各种类型的切片，应用真空负压LSAB法检测时，稀释度在1：100。
3.癌胚抗原（Carcinombryonic antigen ,CEA）
自1965年Go等从结肠癌分离出一种肿瘤的相关抗原后，经过进一步的研究后发现，它存在于胎儿的肠里，由于人们将其称为癌胚抗原。在实际应用中，CEA是一种广谱的标记物。经实验证明，它对胃癌，肠癌，肺癌，乳腺癌，胰腺癌，子宫颈癌，子宫体腺癌，卵巢癌，皮肤鳞状细胞癌，膀胱移行上皮癌，食道癌等，抗原表达阳性，在上述的同类组织及癌旁类性组织，也可见到阳性物，有文献报导，用CEA标记滑膜内瘤，间皮瘤，上皮样内瘤和脑膜瘤，也可表达阳性。
目前，CEA有两种产品，一是单克隆抗体，另一是多克隆抗体。
①单克隆小鼠抗 人CEA，克隆为A5B7。
该抗体的特点，纯度高，杂质含量少，很少引起非特异性染色，同时，也不与含糖蛋白的物质起反应，因此，背景清晰干净。
该抗体可检测上述的病种及其来源的组织，适用于各种切片的染色。稀释度为1：100。
②兔抗人CEA。该抗体为多克隆抗体，纯度不如①号抗体，检测及适应与①号抗体相同，但效果不如①号抗体，且较容易产生背景。稀释度在1：300。
4.山羊抗人甲胎蛋白（Goat anti human alphafeloprotein,AFP）
AFP主要由胎儿肝细胞和卵黄细胞产生的一种酸性糖蛋白少量由胎儿的胸腺、肺、胃、肠道的细胞产生。AFP也不是一种肝癌*的标记物。初用时把AFP作为原发性肝癌的一项特异性诊断指标。随着免疫组化的深入开展和研究的深入进行，实验结果证明：AFP的升高不仅在原发性肝细胞癌的病例，在生殖细胞肿瘤卵黄瘤和睾丸胚胎癌的病例也可大量见到。
用AFP检测后显示阳性的病例有：原发性肝细胞癌，胃癌，卵黄 瘤和睾丸胚胎癌等。其阳性 表达部位主要在细胞浆，也有少量在细胞膜和细胞核上。
该抗体适合于各种切片的标记，可用任何一种 免疫 方法来进行染色，稀释度为1：100-1：300。
上述四种类型的抗体可作为来源于上皮的肿瘤及其它来源的肿瘤的区别。只要损伤正确，抗体的质量没问题，就可获得满意的结果。使用时应根据不同的组织，不同的形态结构，来选择合适的抗体。当然有的肿瘤决不是用一两种抗体就能够把它们给予区分开来。因此，要根据不同的情况合理使用抗体，以便作出正确的诊断。