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人β1肾上腺素受体抗体实验步骤

阅读:331发布时间:2012-05-09

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本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中β1肾上腺素受体抗体含量

标本要求
1.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
操作步骤
1. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品,*标记的抗-IgG抗体,链霉亲和素-HRP,其余各步操作相同)、标准品孔、待测样品孔。然后在标准品孔中加入标准品50μl,在样本反应孔中先加入待测样品10μl再加入样品稀释液40μl(样品zui终稀释度为5倍),盖上封板膜,轻轻振荡混匀,37℃温育45分钟。
3. 配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
4. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复4次,拍干。
5. 加*标记的抗-IgG抗体:每孔加入*标记的抗-IgG抗体50μl(空白孔除外)。37℃温育30分钟
6. 洗涤:操作同4。
7. 加链霉亲和素-HRP:每孔加入50μl的链酶亲和素-HRP(空白孔除外),轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
8. 洗涤:操作同4。
9. 显色:每孔先加入显色剂A 50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

上海科兴是一家专业研发,经营生物、仪器、试剂、耗材的公司,是一家经国家相关部门批准注册的企业。主要经营许多*水平的高科技产品,包括各种试剂,ELISA试剂盒,氨基酸、分离试剂、蛋白质、碳水化合物、植物激素、表面活性剂、缓冲液、染色液,抗生素、维生素和酶类,仪器仪表,标准对照品,实验试剂,试管,滴管,培养皿等及应用领域等产品


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