（一）石蜡切片IGSS
（1）切片脱蜡至水。
（2）0．1％胰蛋白酶37℃消化20min或抗原修复20min（98℃），自然冷却至室温。
（3）0．05mol/L（pH7．4）TBS洗3×3min。
（4）l％EA（卵蛋白）15min，不洗。
（5）适当稀释的特异抗体室温4h或4℃孵育20h，或37℃孵育1h。
（6）0．05m01/L（pH7．4）TBS洗3×5min。
（7）0．02m01/L（pH7．4）TBS（内含0．1％BSA）洗10min。
（8）1％EA 15min，不洗，1：10～1：20稀释的PAGlonm室温孵育1h，或37℃孵育30min。
（9）0．05mol/L（pH7．4）TBS洗10min。
（10）1％戊二醛洗10min。
（11）双蒸水洗5min。
（12）1％明胶洗5min。
（13）银避光显影8～15min。
（14）双蒸水洗15min。
（15）固定：用显影定影液（1：4或1：10）固定5min，也可以用15％硫酸钠-20％*混合液固定1～3min，或用1％戊二醛固定5min，50℃温水洗3～6min。
（16）衬染，核固红衬染3min或甲基绿衬染3min。
（17）常规脱水，二甲苯透明，常规树胶封片。
（18）镜检：阳性物质呈黑色或黑褐色，颗粒分布于抗原—抗体反应部位；背景较干净，呈红色。
胃未分化癌IGSS-P53 HCC IGSS-HBsAg
核内内呈黑色阳性表达，背景为红色，×400 细胞浆内呈黑色阳性，×200
（二）冰冻切片IGSS
做冰冻切片的组织可先经过固定再作切片，也可先制作冰冻切片，然后再固定。这要根据保存抗原的需要而定，固定过的组织可用含20％蔗糖的PBS（0．1mol/L，pH7．4）浸泡过夜，使切片减少冰结晶，保持组织细胞良好的形态结构。切片人0．05mol/L（pH7．4）TBS洗3×3min，染色步骤同石蜡切片。
