1．动物的选择 纯种BALB／C小鼠较温顺，离窝的活动范围小，体弱，食量及排污较小，一般环境洁净的实验室均能饲养成活。目前开展杂交瘤技术的实验室多选用纯种BALB／C小鼠。
2．免疫方案 免疫方案应根据抗原的特性不同而定，选择合适的免疫方案对细胞融合杂交的成功，并获得高质量的McAb至关重要。一般在融合前两个月左右根据确立免疫方案开始初次免疫。对抗原的要求是纯度越高越好，尤其是对于初次免疫所用的抗原。如为细胞抗原，可取1．0X107个细胞作腹腔免疫。可溶性抗原需加*福氏佐剂并经充分乳化。如为聚丙烯酰胺电泳纯化的抗原，可将抗原所在的电泳条带切下，研磨后直接用于动物免疫。
免疫过程和方法与多克隆抗血清制备基本相同，因动物、抗原形式、免疫途径不同而异，以获得价抗体为zui终目的。免疫间隔一般2—3周。一般被免疫动物的血清抗体效价越高，融合后细胞产生价特异抗体的可能性越大，而且单克隆抗体的质量（如抗体的浓度和亲和力）也与免疫过程中小鼠血清抗体的效价和亲和力密切相关。末次免疫后3～4d，可分离脾细胞融合。

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