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人（Human）内脏素 （Visfatin） ELISA检测试剂盒
最近更新时间：2012-7-18
提 供 商：中国ELISA试剂盒商城资料大小：41.5KB
文件类型：WORD 文档下载次数：55次
资料类型：浏览次数：266次
人（Human）内脏素 （Visfatin） ELISA检测试剂盒试验原理：
VISFATIN试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知VISFATIN浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将VISFATIN和*标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中VISFATIN的浓度呈比例关系。
试剂盒内容及其配制：
试剂盒成份 96孔配置 48孔配置
96/48人份酶标板 1块板（96T） 半块板（48T）
塑料膜板盖 1块 半块
标准品：200ng/ml 1瓶（1.0ml） 1瓶（0.5ml）
空白对照 1瓶（1.0ml） 1瓶（0.5ml）
标准品稀释缓冲液 1瓶（8.0ml） 1瓶（4.0ml）
*标记的抗VISFATIN抗体 1瓶（8.0ml） 1瓶（4.0ml）
亲和链酶素-HRP 1瓶（12ml） 1瓶（5ml）
洗涤缓冲液 1瓶（20ml） 1瓶（10ml）
底物A 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml）
底物B 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml）
终止液 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml）
自备材料：
1.蒸馏水。
2.加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3.振荡器及磁力搅拌器等。
4.
样品收集、处理及保存方法：
血清……操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原
和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血红
细胞迅速小心地分离。
2、血浆……EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、细胞上清液……1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、组织匀浆……将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液。
5、保存……如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
ELISA技术的-操作要点：
的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点.本文将叙述板式注意要点,要详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出准确的结果.