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T淋巴细胞分化新发现
点击次数：381 发布时间：2012-7-30
T细胞定向分化过程中，伴随着CD4和CD8共受体分子相互排斥表达模式的逐步建立，具有辅助性功能的CD4T淋巴细胞和具杀伤性功能的CD8T淋巴细胞zui终得以分化成熟并迁移到外周行使免疫功能。CD4和CD8受体分子在这个过程中相互排斥的表达模式是如何形成的一直是过去相当长的一段时间内基础免疫学研究的重点。
其中，CD4分子的调控机制研究得比较深入，发现CD8T淋巴细胞定向分化过程中Cd4沉默子和转录因子RUNX3介导了Cd4基因的转录抑制；而在CD4T淋巴细胞定向分化过程中CD8分子是如何被沉默的并不清楚。在这篇文章中，博士生芮金秀等的研究工作揭示转录因子ThPOK在这个过程中发挥了关键作用。
首先，ThPOK能直接结合包括5个增强子和1个启动子的Cd8基因的顺式调控元件。通过招募去乙酰化酶，ThPOK介导了Cd8基因内组蛋白的去乙酰化作用，进而将Cd8基因推进了异染色区域，导致其转录受到稳定的抑制，蛋白表达逐渐被沉默。
在ThPOK转基因小鼠，Cd8基因的转录和表达受到的抑制被提早到双阳性的早期前体（DP胸腺细胞）阶段。相反，在ThPOK缺失的小鼠中，Cd8基因的转录和表达明显增强，CD4T淋巴细胞定向分化被阻滞。该研究不仅为转录因子ThPOK鉴定到作用靶点；还阐明了CD4T淋巴细胞定向分化过程中CD8分子沉默的调控机制。
测试剂盒检测原理：
ELISA检测试剂盒应用定性夹心免疫检测技术，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板条，这些多肽是中国型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很强的肽段，分别来自于该毒株的开放阅读框2和开放阅读框3。将样品或标准品加入孔中并孵育，如果其中存在HEVIgM抗体，这些抗体就会与HEV的多肽抗原结合，并固定在上面，洗板除去其它非特异性抗体和样品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根过氧化物酶）酶结合物，经第二次孵育后，酶结合物就会与*次孵育结合上的HEVIgM抗体相结合，洗板除去未结合的酶结合物，加入TMB底物溶液，在第三次孵育时会发生酶-底物反应，只有那些含有HEVIgM抗体和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化，加入硫酸溶液终止酶和底物间的反应，并在波长:450nm处测量O.D.值,按照本HEVIgM抗体elisa试剂盒的测试标准,O.D.值大于或等于Cut-Off值的样品被认为是初试阳性。