活化部分凝血活酶时间测定试剂

用于活化部分凝血活酶时间测定的鞣酸活化试剂

仅用于体外诊断

一、应用

活化部分凝血活酶时间（APTT）实验是检测凝血一期因子缺乏，如因子VIII，IX，XI和XII。活化部分凝血活酶时间（APTT）多年来广泛用于手术前的*检查和肝素治疗的监测。所有内源性凝血途径因子对于正常的APTT都是必要的。

APTT同样用于肝素治疗的监测。当肝素含量在0.2 Units/ml或以上时APTT将会延长。

本实验还可用于因子VIII，IX，XI，XII的定量检测。

二、原理

APTT实验检测的是血浆的凝血时间。血浆中加入APTT试剂和氯化钙后即开始凝血反应，测量时间以秒计算。如因子VIII，IX，XI和XII的缺乏在40%或更严重时将会导致APTT结果的延长。当肝素与大量抗*III 存在的情况下也会导致APTT结果的延长。

三、试剂

A.            试剂说明

50420   APTT-EA，4ml

50450   APTT-EA，10ml

Biopool APTT-EA试剂含有作为激活剂的鞣酸，它对*的缺乏和肝素都敏感。试剂还含有兔脑的氯仿提取物和缓冲液及稳定剂。*的含量为1.2%

B.            试剂准备

APTT-EA试剂直接使用。

使用前请恢复至室温并轻摇或倒置以充分混匀。

四、储存和稳定性

在2-8℃储存。不要冷冻。

开封后30天稳定。避免长时间加热。

不要使用过期材料。

五、注意事项

所有的废料都含有生物制剂，应做适当标识并与其它废料单独存放。所有废料的处置都应依照，国家和地方的相关法规进行。

实验应与临床观察和其他实验室实验结果相结合。

六、样本准备

A.  抗凝剂。使用3.2%的*。

B.  样本采集

1.       采集静脉血。

2.       快速地将九份血和一份抗凝剂混合，将试管塞住后倒置能更好地混匀。

3.       将样本在1500×g时离心至少15分钟。

4.       60分钟内用塑料的吸液管将血浆从试管中移至塑料管。

5.       在4小时内检测血浆样本；否则请将其在-20℃冷藏，zui多两周，或在-70℃冷藏zui多6个月，每次使用前需解冻。

七.操作过程

A.            已提供材料：APTT-EA试剂（液体）

B.            还需另外准备的材料（未提供）

1.       0.020 M 的氯化钙（编号50455）

2.       手册,凝血检测的机械或光学方法.

3.       计时器.

4.       封口膜或类似物。

5.       移液器0.1ml

6.       质控血浆。

C.            实验步骤

Biopool的APTT-EA适用于手工或自动化仪器的APTT实验.详见仪器说明.

1.   将APTT-EA试剂和0.020M 的氯化钙预热至37℃。

2.   将双份0.1ml的待测血浆预热至37℃2分钟。

3.   把已预热的0.1ml的APTT-EA试剂加入血浆中。

4.    37℃温育3分钟。

5.    加入0.1ml的已预热的0.010 M的氯化钙

6.    记录凝血形成的时间。

7.    以秒为单位报告凝血时间。

八、结果

计算每份待测血浆和质控血浆重复检测的平均凝血时间。两次检测的差异不应超过5%（如超过需重复实验）。将APTT时间与正常值范围一同报告出来，单位为秒。

质控血浆是用以确保实验可变条件如温度，试剂，仪器，移液管能够工作正常的。建议不要将质控品的检测值一同报告出来。

九、质量控制

Biopool的正常凝血质控血清（编号50100 NCCP）和异常凝血质控血清（编号50101-1/50102 ACCP-2）应与病人血浆同时检测。建议每次实验时都应设置一个正常质控和一个异常质控。

实验室应对每个质控建立允许的实验日间可变质控值范围。

十、期望值

使用Biopool试剂进行APTT实验的正常结果一般在24-33秒。但是，各实验室应根据使用的试剂，仪器和技术建立自己的正常值范围。

当使用仪器，血液收集方法，抗凝剂和试剂批次等有所改变时应调整正常值范围。

十一、限制

特别注意应尽量减少因容易被忽略因素而引起的变异。

A.样本采集应避免：

1．  使用玻璃管。只能使用塑料管。

2．  血液与抗凝物混合太迟。

3．  溶血或脂血

4．  已被组织凝血活酶污染

5．  将血与抗凝物以不恰当的比例混合。

B.实验室技术

1.       在37℃时进行实验

2.       仅使用高纯水。

3.  zui适宜PH值为7.0-7.5

十二、性能特性

A.        因子敏感性

以下是使用Hillman和Lusher方法对Biopool APTT-EA试剂对各种*缺乏敏感性作的研究：

B.        肝素敏感性

很多变化的因素都可能影响肝素化的血浆样本的APTT时间。以下是往正常血浆中加入肝素量逐渐增多时对凝血时间的影响。实验是使用的Biopool APTT-EA试剂在光学法检测仪器上进行的，仅供参考。

正常 – 24-33秒

病人血浆标本凝血时间超过35秒视为异常。

十三、危险和安全性

            危险：*

R22   吞服有害

R32   与酸接触释放有毒气体

S36   穿戴适当的*