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PCR法DNA探针标记试剂盒原理及特点:
PCR标记的原理是用带标记的dNTP进行PCR,zui后得到的PCR产物将带有标记,可以直接用于杂交试验。其原理示意图如下:
PCR法制备DNA探针示意图
本产品是在上述原理的基础上开发,它具有下列特点:
1. 一站式,本试剂盒提供经过优化的试剂,不需要用户自己摸索。
2. 足够10次50 uL体系的常规PCR(用于制备标记反应的模板和设置对照反应)和5次50 uL体系的标记反应。
3. 一次标记可以得到ug级的双链DNA探针或约700ng的单链DNA探针,足够多次杂交实验用。
4. 既可用于制备双链探针,也可以用于单链探针。
5. 90604A需自备含标记核苷酸的dNTP, 90604B和90604C分别含*和地高辛标记的底物。自备的标记包括fluorescein-dUTP、hydroxycoumarin-dUTP、resorufin-dUTP和aminoallyl-dUTP等。
6. 本产品得到的探针参入率一般为4-5%(每100个核苷酸中有4-5个将带有非同位素标记),有效降低了空间阻碍,检测效果*。
7. 可以用于Southern 和Northern Blot、原位杂交、菌落和斑点印迹杂交等分析。
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