Rosetta Chemically Competent Cell 产品说明书
产品规格
Rosetta： 10×100μl
pUC19（control vector）：10pg/μl 10μl
保存条件：-80℃
基因型
F-ompT hsdSB(rB-mB-)gal dcm(DE3) pRARE(argU，argW，ileX，glyT，leuW，proL)(CamR)
产品说明
Rosetta 感受态细胞具有抗性，补充大肠杆菌缺乏的6 种稀有密码子(AUA， AGG， AGA， CUA，CCC， GGA) 对应的tRNA，提高外源基因，尤其是真核基因在原核系统中的表达水平，该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3区（DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶），经pUC19质粒检测转化效率高达108cfu/μg。
操作方法
1. 取100μl冰上融化的Rosetta感受态细胞，加入目的质粒并轻轻混匀，冰上静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基（2YT或LB），混匀后37℃，200rpm复苏60分钟。
4. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT 或LB培养基上。
5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项
1. 感受态细胞在冰上融化。
2. 混入质粒时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒可相应减少终用于涂板的菌量。
