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RAW264.7细胞株的传代

时间:2014-11-7阅读:807
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1) 将培养瓶内旧的培养液弃掉, 然后用D-Hanks液洗两次,(一定要洗干净,以免影响的消化作用)

2) 加入0.25%-EDTA消化,25cm培养瓶加0.4ml, 37度消化5min,镜下看到细胞变圆,间隙增大。

3)立即加含10%FCS的培养液终止消化,用细胞刮刀轻刮,注意,这时候用吸管吹不下来,但是刮刀却很容易刮下来,而且对细胞的损伤极小

4)离心,弃上清,加新的培养液(10%FCS),小心吹匀,分装入新的培养瓶

此法屡试不爽,细胞生长饱满圆润,再也没出现过以前那种情况。

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